橡胶树半胱氨酸蛋白酶基因(HbCP2 和HbCP3) 的克隆与表达分析.pdfVIP

Online system: 农业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2014, 22(6): 690~702 DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.06.004 橡胶树半胱氨酸蛋白酶基因(HbCP2 和HbCP3) 的克隆与表达分析 1，2 2 2 2* 梁启福 辛鲁生 龙翔宇 唐朝荣 1海南大学农学院，海口570228 ；2 中国热带农业科学院橡胶研究所，儋州571737 *通讯作者，chaorongtang@126.com 摘 要 半胱氨酸蛋白酶(cysteine proteinase, CP)是参与植物多种生理过程的一类重要的蛋白酶。为探 究CP 家族基因在橡胶树(Hevea brasiliensis) 中的生理作用，本研究从橡胶树胶乳中克隆了两个CP 基因 的全长cDNA ，分别命名 HbCP2( 1 245 bp)(GenBank 登录号: KF771829)和HbCP3( 1 268 bp)(GenBank 登 录号: KF771830)，分别编码约41 和40 kD 的蛋白质；获得的基因DNA 序列全长分别 1 919 和1 634 bp ， 均包含4 个外显子和3 个内含子；属于木瓜蛋白酶(C1)家族，分别与同属大戟科植物蓖麻(Ricinus communis)(86.86%)及麻风树(Jatropha curas) (84.74%)的一个CP 的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR 分 析显示，HbCP2 在雄花而HbCP3 在胶乳中的表达量最高；HbCP2 和HbCP3 的表达受割胶、伤害、乙烯利、 赤霉素和茉莉酸调控，但不同基因对同一种处理或同一基因对不同处理的反应程度存在较明显差异。研 究结果表明，HbCP2 可能参与橡胶树的环境胁迫应答和细 组织衰老过程的调控，而HbCP3 可能参与橡 胶树的胶乳再生调控以及病害胁迫应答。本研究 橡胶树CP 因家族的研究，探讨CP 在橡胶树中对胁 迫应答和胶乳再生调控机制提供了相关信息。 关键词 橡胶树，半胱氨酸蛋白酶， 因克隆，表达分析，生理功能 Cloning and Expression Analysis of Cysteine Proteinase Genes(HbCP2 and HbCP3) from Para Rubber Tree(Hevea brasiliensis) LIANG Qi-Fu1, 2 XIN Lu-Sheng2 LONG Xiang-Yu2 TANG Chao-Rong2* 1 College of Agronomy, Hainan University, Haikou 570228, China; 2 Rubber Research Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Danzhou 571737, China * Corresponding author, chaorongtang@ 126.com Abstract Cysteine proteinases (CP), an essential component of proteolysis are widely implicated in physiological processes in plants, e.g . plant growth and development, biotic and abiotic stresses. The full- length cDNAs of 2 CPs were cloned from the latex of para rubber tree(Hevea brasiliensis), named HbCP2 (1 245 bp) (GenBank accession No. KF