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微生物营养、生长及控制(下半部分)
由于不同微生物之间的细胞化学结构和代谢的差异,不同的抗生素的抗菌谱各异。 细菌抗药性的产生 抗性菌株特点: 细胞质膜透性改变,使抗生素不进入细胞或进入细胞后被细胞 主动排出; 药物作用靶改变; 合成了修饰抗生素的酶; 抗性菌株发生遗传变异,导致合成新的多聚体,以取代或部分取代原来的多聚体; 避免出现细菌的耐药性的措施: (1)第一次使用的药物剂量要足; (2)避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素; (3)不同的抗生素(或与其他药物)混合使用; (4)对现有抗生素进行改造; (5)筛选新的更有效的抗生素; * * (1)高温灭菌(消毒)法——是最常用的物理方法。高温可引起蛋白质、核酸等活性大分子氧化或变性失活而导致微生物死亡。 6.1.1 温度 ★干热灭菌法(dry heat sterilization) 焚烧法(incineration):是将被灭菌物品在火焰中燃烧,使所有的生物质碳化。简单、彻底,但对被灭菌物品的破坏极大。适用于无经济价值的物品灭菌,及不怕烧的实验器具,如接种环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。 干燥热空气灭菌法(hot-air oven):将物品放入烘箱内,然后升温至150℃-170 ℃ ,维持1-2小时。适用于玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌,不适合液体样品,及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的灭菌。 特点:由于空气传热穿透力差,菌体在脱水状态下不易杀死,所以温度高、时间长。 ★湿热法(moist heat sterilization) : 特点:温度低、时间短、灭菌效果高 原因: 1) 菌体内含水量越高,则凝固温度越低; 2) 蒸汽冷凝会放出潜热; 3) 饱和水蒸汽穿透力强; 4) 湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定,主要破坏氢键结构。 湿热比干热灭菌更好: 更易于传递热量; 更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构; 湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件: 多数细菌和真菌的营养细胞:在60℃左右处理5-10分钟; 酵母菌和真菌的孢子:用80℃以上温度处理; 细菌的芽孢:121℃处理15分钟以上; 高压蒸汽灭菌法 121℃(1kg/cm2或15磅/英寸2)15-20min。 112℃(0.5kg/cm2或8磅/英寸2)20-30min。 115℃(0.75kg/cm2或11磅/英寸2)20-30min。 应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度 例如:生理盐水、营养琼脂等培养基用121 ℃。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112 ℃。 适用:耐高温物品,玻璃仪器、含水或不含水的物品。 高温对培养基的影响及其防止措施 ▲会产生混浊或形成不溶性沉淀 ▲营养成分被破坏( PO4-3存在,葡萄糖生成酮糖); ▲色泽加深(褐变如产生氨基糖等); ▲改变培养基的pH值(通常下降0.2) ; ▲形成有害物质,抑制微生物生长; 消除有害影响的措施: 采用特殊的加热灭菌法 过滤除菌法 加入螯合剂 巴斯德消毒法(Pasteurization): 用较低的温度来杀死其中的病源微生物,这样既保持食品的营养风味,又进行了消毒。该法一般是将待消毒的液体食品置于62℃处理30min,然后迅速冷却。即可达到消毒目的。 低温长时法(Low temperature long time,LTLT):62.9℃ 30min处理牛奶 高温瞬时(Hightemperatureshorttime,HTST):71.6℃15s处理牛奶 超高温巴斯德灭菌法(Ultrapasteurization):让液体食品停留在140℃左右3-4s,急剧冷却至75℃,经匀质化后冷却至20℃。 间歇灭菌法: 将待灭菌物品在80-100℃蒸煮15-60min,冷却后搁置室温(28-37℃)下过夜,并重复以上过程三遍以上。其蒸煮过程可杀死微生物的营养体,但不能杀死芽胞,室温过夜促使残留的芽孢萌发成营养体,再经蒸煮过程可杀死新的营养体;循环三次以上可保证彻底灭菌的目的。适用于不耐高温的物品灭菌,如不适于高压灭菌的特殊培养基、药品的灭菌。 缺点是麻烦、费时。 低温是通过降低酶反应速度使微生物生长受到抑制。 冷藏法:5℃,微生物斜面菌种放置冷藏箱中可保存数周至数月而不衰竭死亡;食品保鲜 冷冻法:食品工业中采用-10℃左右的冷冻温度较长时间地保藏食品;冷冻法也可用作菌种保藏,但所需温度更低,如-80℃低温冰箱、或-78℃干冰、或-80℃液氮中冷冻保存。 (2)低温抑菌 采用滤孔比细菌还小的筛子或滤膜作成各种过滤器,当空气或液体流经筛子或滤膜时,微生物不能通过滤孔而被阻留在一侧,从而达到灭菌的目的。但不能
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