幽门螺杆菌检查在临床中的应用.pdfVIP

世界最新医学信息文摘2014年第 14卷第 7期 169 · 医学检验 · 幽门螺杆菌检查在临床中的应用 汤东哲 ，汤东霞 (1．绥化市北林区疾病预防控制中心，黑龙江 绥化 152000；2．绥化市第一医院 皮肤科，黑龙江 绥化 152000) 摘要：目的 研究幽门螺杆菌 (Hp)检查在临床疾病诊治中的意义。方法 对采集来的标本进行幽门螺杆菌 (Hp)检查， 比较不同方法检出的效果。结论 通过幽门螺杆茵 (Hp)检查，可有效诊断出Hp感染率，从而利-I-*,1定合理的临床治 疗方案。 关键词：幽门螺杆菌；检查；应用 中图分类号：R446 文献标识码 ：B DOI：10．3969／j．issn．1671-3141．2014．07．118 1 标本的采集、处理和运送 脂4g、蒸馏水 980ml、含 甲氧苄氨嘧啶5mg、苯头孢霉素 1．1 活组织标本 5mg、万古霉素 10rag、两性霉素 B5mg。 通过纤维胃镜取活检标本 ，应多采几个部位 ，包括十二 2．2．4 液体培养基 指肠球部、胃囊部、胃小弯等处 [1】。一份用福尔马林 固定， 分离培养Hp大多采用固体培养基，用液体培养基培养 供组织学检查用 ；另一份置于无菌试管或0．5ml无菌生理盐 Hp比较复杂、困难 ，液体培养成功与否主要取决于气体能 水中，用组织匀浆器捣碎 ，也可直接放在培养基上 ，多面压 否在培养基中充分弥散。方法有 ，用组织培养瓶加入少量 印或用无菌剪刀反复剪碎后 ，压 印涂布平板划线分离 ，于 液体培养基 ，在微氧环境 中振荡培养 ，常用布氏肉汤、哥 微需氧环境 、37℃培养3—5d。标本接种应尽快完成 ，如 伦 比亚 肉汤等，但一定要加马血清或小牛血清或酵母指取 布+能及时接种 ，可放在0．5ml浓度为200g／L的葡萄糖液中， 液。 3h内送检 1。 2-3 细菌鉴定 1．2 粪便标本 细菌于微需氧环境，37℃，培养 7d(一般 3—4d)， 收集新鲜粪便于已称重 的密闭的无菌小瓶内，应在 3 挑取可疑菌落，一般为灰色、半透明、直径 1～2mm小菌落 ， min内完成 ，将粪便悬浮于0．1mol／L磷酸缓冲盐水 (pH7．0) Hp在TTC培养基中，可呈黑色金属闪光 ，更易识别。将可 中，每 1Ornl磷酸缓冲盐水 中放 2g新鲜粪便。磷酸缓冲盐 疑菌落做氧化酶试验，若阳性，涂片革兰染色，Hp为 “u”、“s” 水 (PBs)应新鲜配制 ，经 121℃ 15min灭菌 ，冷却后将微 形弯曲状革兰阴性杆菌。螺杆菌属细菌经 DNA杂交和相关 氧混合气 (5％O2、10％CO2、85％M)通过灭菌的微孔滤膜 生化反应已定名有 9个种 ，Hp为螺杆菌属的一个种。螺杆 (0．22I．LIn)加压 (2．5P)充人 PBS内。将粪便混匀 ，过滤二次 菌属中与人类相关的有三个种，为幽门螺杆菌、同性恋螺 (第一次通过 500I．LIn滤膜，第二次通过 250 in滤膜 )除 杆菌和芬尼螺杆菌。 去大颗粒物质 。滤液经 1500g离心 30min，沉淀用 PBS混 3 Hp的快速检查方法 悬 ，再离心。收集乳 白色细菌沉淀 ，一部分接种平板培养基 ， 3．1 快速脲酶试验 一 部分作快速脲酶试验。从标本收集到接种完毕应在 1．5h 该试验具有简便快速的特点，是检测 胃活检组织 Hp常 内完成 。 用的方法。方法 ：将 胃粘膜活组织标本 1—2块 ，用无菌 2 分离培养 剪刀剪碎，置于尿素培养基 中，37％℃育，6h内出现红色 2．1