转Hu-IFN-α草鱼性腺发育的研究以及Hu-IFN-α在转基因草鱼体内的遗传.pdfVIP

、 摘 要 、 草鱼是我国主要的养殖品种之一，但其病害多，每年给我国淡水养殖业造成数 亿元经济损失，尤其是病毒性的草鱼出血病；因此草鱼抗病育种一直是我国水产工 作者研究的重点。在草鱼抗病育种的初期，育种的方法多采用常规杂交和选择压力 育种；到20世纪50年代末60年代初，随着细胞工程技术的发展，细胞工程在草 鱼抗病育种上也得到了充分的运用。然而，这些育种技术均存在育种周期长、优良 性状遗传不稳定等不足之处。随着DNA重组技术的发展，基因工程技术为这一目标 的实现奠定了基础，这也为定向培育新的品种开辟了一条新途径。 Q 构建成能在鱼体内组成型表达Hu—IFN—Q的基因重组分子，采用显微注射法将 Hu—IFN—Q重组基因注射入草鱼卜2细胞期的受精卵，培育出转人Q一干扰素基因草 鱼，实验证明转人Q一干扰素基因草鱼对草鱼出血病病毒的抗性比普通草鱼提高了 66％。Hu—IFN—Q基因作为鱼类一种新的转植基因，那么它对鱼类性腺发育及孵化是 否存在影响，同时它在子一代中的遗传和表达情况如何?都值得研究。本文就这几 个方面进行了研究和探索。 1．将处于不同发育时期的转基因草鱼性腺和相对应的普通草鱼性腺，作组织切 片检查，以研究人a一千扰素基因对草鱼发育的影响；结果表明，人Q一干扰素基因 作为鱼类一种新的转植基因，它对鱼类性腺发育及孵化无显著影响。 干扰素基因在转基因草鱼Fl代中的表达水平。．结果表明，转人Q干扰素基因草鱼 F1代表达率为52．1％，但表达水平偏低。 二3．?通过PcR检测转基因草鱼Fl代的阳性率；实验证明转人Ⅱ一干扰素基因草鱼 F1代阳性率为53．8％。 对草鱼出血病病毒的抗性，攻毒实验表明转人Q一干扰素基因草鱼Fl代对草鱼出血 I．9‰ 病病毒抗性比髀通啦m捉商／1 关键词：人u一干扰素基因转基因草鱼性腺ELIsA I，cR草鱼出血病病毒 ofour raised its Grassisone Varieties，but carp country’sma．．oraquatic Vulnerability todiseasescoststhewhole offreshwatercultiVationhundredsofmjllions industry yuans whichthe Virusisofthemostserioustllreat．Sotheresearchon annually，of hemorrhagic disease-resistantbreedof has the f．ocusinthe grass carpcontinuouslybeingVery aquatic Intheinitial mutine and theselectiVe deVel(1pment． stage， hybridization pressure are ofthelater50sand 60soflast also breeding adopted，while‘theperiod early century w．tncssc【|Ihc ‘rcclI