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过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)配体15d．PGJ2对ECV304内皮细胞增殖和凋亡的影响 对ECV304内皮细胞增殖与调亡的影响 专 业 心血管内科学 硕士研究生 陈丹丹 导 师 董吁钢教授 中山大学附属第一医院心内科 摘要 背景 所致的心血管疾病严重危害人们生命和健康。目前有关AS发病机制的理论可归 纳为。损伤反应学说”(Response-To-InjuryHypothesb)，该学说认为是血管内 皮对损伤因素的反应启动了AS斑块的形成过程。可以概括如下：危险因子如慢 性高腊血症、高血糖、高血压和吸烟等一旦损伤了内皮，循环中的单核细胞和血 小板可与受损的内膜(内皮)粘附，其中单核细胞通过化学趋向作用，从内皮细 胞间迁移至内皮下间隙，在该处单核细胞转变成巨噬细胞，并开始表达出对修饰 LDL的受体，结果巨噬细胞吞噬并积聚LDL，最终变成泡沫细胞，泡沫细胞诱发 脂质条纹的形成。在对动脉粥样硬化发病机制的研究过程中，人们发现内皮细胞 的凋亡在动脉粥样硬化的发病过程中扮演着重要的角色，并提出动脉粥样硬化也 是一种以细胞增殖和变性为主的疾病。但是内皮细胞凋亡对动脉粥样硬化是损伤 性因素还是保护性因素还值得进一步探讨：在人体实验、动物实验和体外实验都 已证实了在动脉粥样硬化过程中存在内皮细胞凋亡增加的现象，即内皮细胞的损 伤和功能的改变可能是动脉粥样硬化病变发生发展过程中的启动因素；然而，内 皮细胞的凋亡可以抑制斑块中新生血管的形成，稳定动脉粥样斑块，防止血栓栓 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)配体15d-PGJ2对ECV304内皮细咆增殖和凋亡的影响 塞的发生，即内皮细胞凋亡也可起抗动脉粥样硬化的作用。因此研究内皮细胞结 构和功能的改变及其机制，是阐明As形成分子机制的重要环节。 过氧化物酶体增殖物激活受体peFoxlsome actirated protiferator Y的天然配体。PPARs是配体依赖性转录因子，其配体与PPAR结合诱导核受体 x 发生形态改变而激活，与视黄酸受体x(retinoic receptor，RxR)或糖皮质 激素受体形成异二聚体，再结合于靶基因的特异性DNA序列(过氧化体增殖反应 元件，PPRE)，使靶基因活化。研究证实PPARs配体可以降低血浆甘油三酯，升 高高密度脂蛋白，改善高脂血症患者的脂质代谢；PPARs配体还可抑制动脉壁炎 症反应，稳定动脉粥样斑块，减轻血管内膜的增厚。但是同时也有研究表明PPARs 的活化可促使巨噬细胞表达清道夫受体，从而促进巨噬细胞的泡沫化，使动脉粥 样斑块加剧恶化。以上证据表明PPARs与动脉粥样硬化有密切的关系，但其对动 脉粥样硬化的发展是保护作用还是损伤作用尚未完全清楚。最近的研究显示， PPARs的活化可以诱导多种细胞的调亡，如内皮细胞、平滑肌细胞、单核细胞／ 巨噬细胞，绒毛膜癌细胞和胃癌细胞等。本研究试从内皮细胞的凋亡和增殖的角 度探讨PPARs与动脉粥样硬化的关系。 目的 察PPAR7配体对内皮细胞增殖和凋亡的影响，弗探讨其中的分子机制。同时也 可能为PPAR7与动脉粥样硬化的关系提供新的理论依据。 材料 ECV304人脐静脉内皮细胞株 kbDNA RPMI A，1 ladder，琼月旨糖、蛋白酶K，碘化 1640培养基，RNase 盒，逆转录试剂盒，15d—PGJ2。 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)配体】5d-POJ2对ECV304内皮细胞增殖和凋亡的影响 方法 1．细胞培养：常规ECV304内皮细胞培养 2．甲基偶氮唑盐(岍T)比色法检测生长率： a．实验分组：以5×104／孔细胞接种于96孔板上，更换新鲜无血清培养基，同 时根据处理因素不同分为4组： 对照组：继续无血清培养