光学显微镜Lightmicroscopy.PDF

(二倒) 立光學顯微鏡 倒立顯微鏡常用於觀察培養中的細胞或組織 ，特別是應用在螢光的生物樣品上。 倒 立光學顯微鏡 光學顯微鏡的功能 •1.高倍率顯微放大 •2.觀察表面粗糙度 •3.有螢光幕可顯像 •4.顯像可由熱感應報表機印出 •5.顯像可由照相機或拍立得照相 光學顯微鏡的應用 •(1)元件橫截面結構觀察 •(2)平面式去層次 (Delayer) 結構分析與觀察 •(3)析出物空乏區 (Precipitate Free Zone) 的觀察 •(4)差排線與過蝕刻(Overetch)凹痕的觀察 •(5)氧化疊差 (Oxidation Enhanced Stacking Faults, OSF)的研究等。 並發展出立體顯微鏡及工具顯微鏡等相關儀器設備 介紹 •光學顯微鏡依其聚光鏡(condenser)和物鏡 (Objective)的設計，可用來觀察不同的樣 品。可分為下列四種 : 1.明視野 2.暗視野 3.相位差 4.微分干涉差 •依光源的不同，還有螢光顯微鏡 、共聚焦 顯微鏡 等類別。 1.明視野（ bright field ） •最基本的觀察模式，主要是用 來觀察透或 近乎透明的材料(如:物體或生物標本) 。 •此種觀察用除較簡單的低等生物(如細菌、 真菌和大部分藻類等等)外，大都需用經過 事先的處理和切成薄片，製成切片才可以 在顯微鏡下觀察。 2.暗視野（ dark field） 利用一個不透光的濾片遮掉聚光鏡上大部 分的光線，僅聚光鏡邊緣的光線可以通過。 適合用於觀察小而薄、近乎透明或 纖細的 構造，如細菌或鞭毛或用於微小個體的計 數。 明、暗視野的差別 (a).明視野 (b).暗視野 明、暗視野的差別 明視野 暗視野 3. 相位差（phase contrast） •利用 光波通過標本物體速度會被減緩或 加 速 而與通過封片介質之光波產生“out of phase”的現象，造成光波互相干擾形成明 暗對比。 • 相位差用 以觀察透明無色的物體。 •當光線通過標本時光波行進速度受影響， 而與其他光線產生約90度的 out of phase 。 •再利用物鏡內之 phase plate加強干擾作用， 使通過物體邊緣的光加速，而與通過物體 的光成 180度的 out of phase ，形成破壞性 干擾使物體影像變暗，但具有明亮之輪廓。