入出境人员猴痘检验规程编制说明-检验检疫标准管理信息系统.DOC

《》编制说明 工作概述 1.1 任务来源 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由国家质量监督检验检疫总局批准。 计划编号：2009B225 类别：卫生检疫 标准名称： 负责起草单位：广东出入境检验检疫局 标准的目的、意义及国内外有关标准简要说明 1.2.1 埃博拉出血热（EBHF）是一种由埃博拉病毒（EBOV）引起的烈性传染病，病死率很高，可达50－90％，临床上以发热及出血为特征。埃博拉病毒源于非洲的刚果，在生物安全等级上和天花病毒同为最危险的第四级，1976年首度在非洲扎伊尔北部和苏丹南部出现，此后又先后出现在加蓬、刚果、科特迪瓦、乌干达等国家中。世界卫生组织已将埃博拉病毒列为对人类危害最严重的病毒之一。其疾病特征为突然发热、极度虚弱、肌痛、头痛以及咽痛，继而呕吐、腹泻、皮疹、肝功能和肾功能受损。部分病例还可出现内脏和体表大量出血。实验室检查白细胞和血小板减少，肝酶升高。疾病早期症状与一般感冒相似。刚果民主共和国、加蓬、苏丹、象牙海岸，乌干达以及刚果共和国均有埃博拉确诊病例报告；利比里亚、英国报告有个别病例（英国病例源于实验室感染）。埃博拉病毒属丝状病毒科丝状病毒属，可分为四种不同亚型：扎伊尔埃博拉（EBO-Z），苏丹埃博拉（EBO-S），科特迪瓦埃博拉（EBO-C）和莱斯顿埃博拉（EBO-R）。前3种亚型可使人和灵长类动物发病，其中扎伊尔埃博拉的致死率为88.8%；苏丹埃博拉则为53.2%。而瑞斯顿埃博拉只会使灵长类动物发病，但人类也可能感染这种病毒亚型从而成为无症状的病毒携带者，在西太平洋就有这种病例出现。埃博拉出血热有4个传播途径：直接接触病人的血液、分泌物等体液传播；通过直接接触病人尸体传播；处理发病或病死的猩猩、猕猴等动物引起传播；医务人员在护理病人时不采取有效的个人防护也会引起传播。此病目前没有有效药物可以治疗。 1.2.2 制定的必要性 1.2.3 国内外有关标准简要说明 2 研制过程 本标准由广东局技术中心卫生检疫实验室（BSL-3实验室）于200年1月申报，国家质检总局下达的任务。本标准研制过程主要经过以下几个阶段。 2.1 资料查阅与实验设计 为了全面了解国内外埃博拉病毒检验、研究的相关情况，本实验室相关工作人员从申报本标准之前就一直密切关注国外埃博拉疫情动态及国内外研究进展，查阅了该领域大量的文献。从文献中寻找设计思路，特别是在该病毒的检验方法上，设计和尝试了多种实验方案，并及时依据国内外报道调整和改进实验方案。 2.2引物、探针的设计 病毒用Primer Express 2.0软件特异性引物、探针， CTT+CCT+CATAGTTATT+CG+CACAC–BHQ1 预期扩增片段为90bp或93bp，探针序列中前面带“+”号的碱基表示LNA修饰碱基。 2.2.3 基因芯片及阳性、阴性对照探针： EBOV-1：CAACCAGGCAACCTCCACATCACCAAGTCGGGTTCAAACACCAACCAACCACAAGGCAATATGTCATCTA EBOV-2：TCTCAGGAGAACATTGGCTGCTATGCCCGAAGAGGAGACAACGGAAGCTAATGCTGGTCAGTTTCTATCC EBOV-3：CTGCAAGATAAGGGCATCAAACAGGGTGTGTAGCTCTTTCACATATTTGGGCTCCTACTGGGCTAGGGTT EBOV-4：TTCCTAGTGACTCCAACTGTGCAAGGATGGAAGGTTTACTGGGCTGGACTTGAGTTTGATGTCAACCAAA EBOV-5：GAAGGCAAACATTCCACTATGGGTTGTCTATCCTCTCGAAGGCCAACGCCCTGATCCTCCTGGTGAATTT EBOV-6：CAATGTCCGCAGTGTTCAAATGCAAAGCAACCAGGTGGGAAACCATTCGTGTCAGTGGCAGTCAAGAAAC EBOV-7：CCTTCCTCCAGGAGTTCGTTCTTCCGCCAGTCCAACTACCCCAGTATTTCACCTTTGATTTGACAGCACT EBOV-8：GATCCAACTGACTCACAAGATACGACCATTCCTGATGTGGTGGTTGATCCCGATGATGGAAGCTACGGCG EBOV-9：GCATCATTGGCGTACTGGAGGAGCAGGCACAGAAACAGCAACCGAAAATACTTGGCAAGAGACTCTTCAA EBOV-10：GCCAGGAACCAGGACAGTGACAACACCCAGCCAGAACACTCTTTTGAGGAGATGTATCGCCACATTCTAA EBOV-11：TGGACACGACCACCATGT