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高效液相色谱High Performance Liquid Chromatography (HPLC) 一、 概述 二、 HPLC仪器 高压输液装置; 进样系统; 分离系统;检测系统;辅助系统 三、 流动相和固定相简介 四、 高效液相色谱方法各论 分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱和亲和色谱等 高效液相色谱(HPLC)是Huber和Hulsman于1967年提出的一种新的快速分离技术。 高效液相色谱(HPLC)是以溶剂液体为流动相的色谱方法。 按照固定相不同可分为：液液分配色谱；吸附色谱(液固色谱)；离子交换色谱；尺寸排阻色谱(凝胶渗透色谱)。此外，还有亲和色谱、平板色谱(薄层色谱)等。 早期液相色谱，都是在直径1~5cm, 长50~500cm的玻璃柱中进行的。为保证有一定的柱流速，填充的固定相颗粒直径多在150~200?m范围内。即使这样，流速仍然很低(1mL/min)，分析时间仍然很长。 当加压增加流速(真空或空气泵)时，尽管分析时间减少，但柱塔板高度Hmin也相应增加了，或者说柱效下降了。 为了解决分析时间及柱效问题，人们认识到：最为有效地增加柱效的唯一方法是减小填充物的粒径(3~10 ?m )。 直到20世纪60年代，由于在高压下操作的液压设备、高效固定相以及高灵敏检测器的出现及发展，才彻底解决了分析时间及柱效的问题。