普通生魏惋学.ppt

* Neg. number refers to the number of bases upstream from where transcription begins Sequences of non-template polynucleotide * * 核心酶在σ因子的参与下与模板的DNA接触，生成非专一的，不稳定的复合物在模板上移动； 2. 起始识别：全酶与模板的启动子结合，产生封闭的“酶-启动子二元复合物”（closed binary complex） 3.???? 全酶紧密地结合在启动子的-10序列处，模板DNA局部变性，形成“开放的启动子二元复合体”（open binary complex）； 4. 酶移动到转录起始点挂上，第一个rNTP转录开始，σ因子释放，形成酶-启动子-rNTP三元复合体。 * * * ρ因子作用机制： 很可能直接在转录泡中接触RNA-DNA杂合链、并导致其解链。 或是由于ρ因子和RNA pol的相互作用，通过释放ρ和RNA pol使转录完全终止 * 一种毒菌类鬼笔鹅膏（Amanita phalloides）所生成的具有双环结构的八肽毒素。对动物的致死作用是：在真核细胞核内抑制催化合成mRNA，该物与RNA聚合酶Ⅱ（或B）进行特异性结合，从而抑制磷酸二酯键的形成（RNA链合成的起始和延长）。在真核细胞RNA聚合酶的识别或RNA聚合酶Ⅱ的定量等方面是有用的。 * The TATA box has the core DNA sequence 5-TATAAA-3 or a variant, which is usually followed by three or more adenine bases. * CTD is rich in serine and threonine, regulation of their phosphorylation status Involved in polymerase activity during initiation and elongation, and even in RNA processing. CTD富含Ser和Thr, 它们的磷酸化状态的调节参与RNA聚合酶II的转录起始、延伸、加工等反应，十分重要。 2) Amino acid sequence: Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser. Repeated 26 x (yeast), 40(fruit fly) 52x in mouse CTD的七肽重复顺序在酵母、果蝇和哺乳动物中分别重复26次、40次和52次。 CTD的存在对于细胞的存活必不可少，酵母细胞至少需要10个拷贝的CTD才能存活。 CTD is rich in serine and threonine, regulation of their phosphorylation status Involved in polymerase activity during initiation and elongation, and even in RNA processing. Amino acid sequence: Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser. Repeated 26 x (yeast), 40(fruit fly) 52x in mouse 3类RNA聚合酶； 真核生物的RNA聚合酶 结构比大肠杆菌RNA聚合酶复杂； 在细胞核中的位置不同； 负责转录的基因不同，对α-鹅膏蕈碱的敏感 性也不同。 真核生物RNA聚合酶一般有8-14个亚基所组成，相对分子质量超过5×105。 * 真核生物中RNApol的作用必须有其他相关转录蛋白在启动子位置先期结合才能启动转录. 这类是起正调控作用的反式作用因子，即为转录因子。 真核转录起始需要各种转录因子（TF） * 真核生物RNA聚合酶Ⅱ转录因子及其功能 * 真核生物的转录过程 1. 转录起始的上游区段：Upstream activating sequence，UAS（上游激活序列） 真核生物的转录起始点上游-35~-25bp区也存在一段富含TA的顺序，被称为Hogness盒或TATA盒，通常认为是启动子的核心序列。 （一）转录起始： 真核生物的启动子 * TATA Box （ TATA元件） 1) Similar to the prokaryotic Pribnow box, it locates at 25-35 bp upstream of initiation site, the consensus sequence is TATA(A/T)A. 2) TATA box makes transcri