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核酸分子杂交的应用 研究DNA分子中某一种基因的位置 定两种核酸分子间的序列相似性 检测某些专一序列在待检样品中存在与否 是基因芯片技术的基础 * * * * 遗传度(率):易患性高低受遗传基础和环境因素双重影响,其中遗传基础所起作用的大小称为遗传度(率) 哮喘病遗传度为80% 精神分裂症为80% 高血压遗传度为62% 冠心病遗传度为65% 糖尿病遗传度(幼年型)为75% 糖尿病遗传度(老年型)为35% 唇裂+腭裂遗传度为76% 多 基 因 病 遗 传 特 点 1 发病有家族聚集倾向,患者亲属的发病率高于群体发病率 2 患者双亲、同胞、子女的亲缘系数相同,均为1/2,有相同的 发病风险。 3 随着亲属级别的降低,患者亲属的发病风险迅速降低,群体 发病率愈低的病种中,这种特征愈明显。这与AD病中亲属级 别每降低一级,发病风险降低1/2的情况也是不同 4 近亲婚配时,子女的发病风险增高,但不如AR病显著 5 发病率有种族差异 三 RNA的结构与功能 RNA的种类、分布、功能 MicroRNA 一 、信使RNA的结构与功能 hnRNA 内含子 (intron) mRNA * mRNA成熟过程 外显子 (exon) 目 录 * mRNA结构特点 1. 大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷,同时第一个核苷酸的C′2也是甲基化,形成帽子结构:m7GpppNm-。 2. 大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(polyA)结构,称为多聚A尾。 帽子结构 mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 帽子结构和多聚A尾的功能 * mRNA的功能 把DNA所携带的遗传信息,按碱基互补配对原则,抄录并传送至核糖体,用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。 DNA mRNA 蛋白 转录 翻译 原核细胞 细胞质 细胞核 DNA 内含子 外显子 转录 转录后剪接 转运 mRNA hnRNA 翻译 蛋白 真核细胞 * tRNA的一级结构特点 含 10~20% 稀有碱基,如 DHU 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 具有 T?C 二、转运RNA的结构与功能 N,N二甲基鸟嘌呤 N6-异戊烯腺嘌呤 双氢尿嘧啶 4-巯尿嘧啶 稀有碱基 * tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 D环 反密码环 额外环 TΨC环 氨基酸臂 额外环 * tRNA的三级结构 —— 倒L形 * tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体,参与蛋白质的翻译。 * rRNA的结构 三、核蛋白体RNA的结构与功能 * rRNA的功能 参与组成核蛋白体,作为蛋白质生物合成的场所。 * rRNA的种类(根据沉降系数) 真核生物 5S rRNA 28S rRNA 5.8S rRNA 18S rRNA 原核生物 5S rRNA 23S rRNA 16S rRNA 四 、其他小分子RNA 除了上述三种RNA外,细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA,统称为非mRNA小RNA(small non-messenger RNAs, snmRNAs)。 snmRNAs snmRNAs的种类 核内小RNA 核仁小RNA 胞质小RNA 催化性小RNA 小片段干涉 RNA snmRNAs的功能 参与hnRNA和rRNA的加工和转运。 RNA interference appears to play important roles in normal functions of the cell, for example, aspects of chromatin structure, including the assembly and maintenance of heterochromatin (silenced chromatin). Andrew Fire Craig Mello * 四 核 酸 的 理 化 性 质 目 录 1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA(或RNA) 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0 吸光度值OD260的应用 目 录 二、DNA的变性(denaturation) 定义:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。 方法:过量酸,碱,加热,变性试剂如尿素、 酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 变性后其它理化性质变化: OD260增高 粘度下降 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 目 录 DNA
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