质谱技术解析磷酸化蛋白质组.pdfVIP

· · 生物化学与生物物理进展 ； （） 3%# #$’($)*+,’($*/ ##3 01 3 % -. 质谱技术解析磷酸化蛋白质组! ，） ） ） ! ! !! 姜 颖 徐朗莱 贺福初 ） ） ! （军事医学科学院放射医学研究所，北京 ； 南京农业大学生命科学学院，南京 ） !##$%# !##% 摘要 蛋白质磷酸化是生物体内存在的一种普遍的调节方式，在细胞信号传递中占有极重要的地位 质谱已逐 ’ 渐被人们认为是挑战这一领域的有利工具’综述了目前利用质谱技术分析磷酸化蛋白质的方法，包括利用固定 化的金属亲和层析柱、抗体和化学标签技术富集目的分子，肽片段质量图和前体离子扫描 （ ） )*+,-.)/.0-+10- ( 等技术检测磷酸化肽段，串联质谱对磷酸化肽段测序鉴定磷酸化位点，以及引入质量标签对蛋白质的磷酸化水 平进行定量等’虽然现在已经有很多可行的方法用于分析磷酸化蛋白质，但要达到从少量生物样品中解析其全 部磷酸化蛋白质仍需要有很多技术上的突破’ 关键词 质谱，串联质谱，磷酸化蛋白质组 学科分类号 2%!3 许多基因组测序计划的成功及在转录水平上检 电泳 （ ）和高压液相色谱 （ ）被检测 89: ;7= 测基因表达差异技术的不断发展，使蛋白质组技术 到 检测到的蛋白质可以通过全部水解确定磷酸化 ’ 研究的主要方向———发展先进的方法鉴定一个基因 氨基酸的含量 若需确定磷酸化位点，还需要通过 ’ 组所表达的全部蛋白质———也发生了改变’蛋白质 蛋白水解酶消化放射性标记的蛋白质、分离磷酸化 组技术研究的最初目标集中于高效、快速地鉴定大 的肽段，如通过二维肽图 （ 5.8?/6*0-/.01@ *5/?* (( 量蛋白质，随着样品制备和分析手段的不断提高， ），再通过 降解对肽测序 这些技 61 /0 :?610 ’ (( A