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应用昆虫学报Chinese Journal of Applied Entomology 2014, 51(3): 733−740. DOI: 10.7679/j.issn.2095−1353.2014.088
五龄飞蝗不同发育时间实时定量
PCR 内参基因的筛选*
** ***
崔 淼 刘晓健 李 涛 郭亚平 马恩波 张建珍
（山西大学应用生物学研究所 太原 030006 ）
摘 要 【目的】筛选 5 龄飞蝗不同发育时间的最适内参基因，为相关研究提供基础数据。【方法】本
文选取β-肌动蛋白（β-actin ）、延长因子（EF-1α）、3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH ）、核糖体蛋白49 （RP49 ）、
α-微管蛋白（α-Tubulin ）和18S 核糖体RNA（18S rRNA ）基因作为候选内参基因，运用实时定量PCR（qPCR ）
方法研究各基因在5 龄飞蝗不同发育时间的相对表达量，用geNorm 与Normfinder 软件分析这6 个基因表
【结果】geNorm 分析结果显示6 个内参基因表达稳定度M 值顺序为：β-actin （0.3720 ）＞RP49
达稳定性。
（0.3750 ）＞α-Tubulin （0.4030 ）＞18S rRNA （0.4270 ）＞EF-1α （0.4970 ）＞GAPDH （0.6040 ）。M 值越
小表示基因表达稳定度越高，同时geNorm 软件以标准化因子配对差异值（Pairwise variations ）0.15 默认
为取舍值，由于V2/3=0.098 ＜0.15 ，所以最适内参基因数目为2 个。运用NormFinder 软件也得出相似的
结果。【结论】β-actin 与RP49 为5 龄飞蝗不同发育时间的最适内参基因。
关键词 飞蝗，实时定量PCR ，内参基因，geNorm ，NormFinder
Selection of reference genes on different days during the development
of the fifth-instar nymph of Locusta migratoria with
quantitative real-time PCR
** ***
CUI Miao LIU Xiao-Jian LI Tao GUO Ya-Ping MA En-Bo ZHANG Jian-Zhen
(Research Institute of Applied Biology, Shanxi University, Taiyuan 030006, China)
Abstract [Objectives] To identify the most appropriate reference genes on different days during the development of
fifth-instar nymphs of Locusta migratoria to pave the way for relevant studies. [Methods] Six genes were selected as
candidate reference genes, including the beta actin gene (
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