利用p因子不精确剪切获得tis11基因敲除果蝇-core.pdfVIP

第 46 卷 　第 6 期 ( ) Vol . 46 　No . 6 厦门大学学报 自然科学版 　2007 年 11 月 J our nal of Xiamen U niver sit y (N at ural Science) Nov . 2007 　 利用 P 因子不精确剪切获得 Tis11 基因敲除果蝇 谢昌传 ,汪雪坤 ,李立胜 , 田丽丽 ,吴秀榕 ,洪丽欣 ,周化民 (厦门大学生命科学学院 ,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 ,福建 厦门 36 1005) 摘要 : Tis 11 是哺乳动物基因 T TP 在果蝇中的同源物 ,其基因位于果蝇 X 染色体 11B9 区. 它含有两个保守的顺式 Cy s X CysX CysX Hi s (CCC H) 锌指结构. 它与 mRN A 的稳定性有关. 为了进一步从动物水平研究 Tis 11 的生物学功能 , 8 5 3 作者利用 P 因子不精确剪切的特性来获得 Tis 11 基因敲除果蝇. 以 P 因子插入果蝇 19949 为起始材料 ,经过一系列杂交 后 ,挑取了700 株 P 因子被切除的果蝇. 通过 PCR 筛选和鉴定 ,从这 700 株果蝇中获得一株果蝇 279 ,它的 Tis 11 基因的 第 2 个外显子中包括翻译起始位点的区域被删除. 关键词 : 果蝇 ; P 因子 ;不精确剪切 ; Tis 11 中图分类号 :Q 356 . 1 　　　　文献标识码 :A 　　　　　文章编号 (2007) ( ) 　　黑腹果蝇 D ros op hi l a m el anog as ter 是遗传学中 殖细胞中 ,3 个内含子均被剪切 ,4 个阅读框拼接在一 最普遍使用的研究材料 ,是奠定经典遗传学基础的重 起形成 m RN A ,它编码一个 87 ku 的具有转座酶活性 要模式生物之一. 基于清晰的遗传背景和便捷的遗传 的蛋白. P 因子转座时 ,它结合在 P 因子两端的亚末端 操作 ,果蝇在发育生物学 、生物化学 、分子生物学等领 区域并且抑制转录[ 7 - 8 ] . 在体外转座时 , GTP 是转座 域占据了不可替代的位置. [9 ] 所必需的 . P 因子通过一种 Tn 10 式的非复制型“切 在果蝇的基因组内含有许多可转座的元件家族 , 割和粘贴”机制发生转座. 如 : hoho 、m a ri ne r 、H e rm es 、M i nos 、p i g g y B ac 等[ 1 - 3 ] . 自P 因子被发现以来 ,它已经成为绘制果蝇基因 其中一类与细菌的转座子很类似 ,称为 P 因子. 这类 组图谱的强有力的分子生物学工具. 以 P 因子为基础 元件两端有短的反向重复序列 , 当它插入到基因组中 的一系列的转基因载体被成功开发 ,并用于果蝇基因 时 ,会在插入位点产生靶位点 DN A 的正向重复序列 ; 功能的分析. 现在 P 因子主要被用于基因突变[ 10 ] 、转 与细菌转座子一样 ,这些元件在基因组外就失去了它 基因、增强子捕捉 、位点特异性基因重组 、基因替换和 的功能. 所有 P 因子末端都具有 3 1 bp 的反向重