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应用指南
Gibco® RevitaCell™添加剂
单细胞传代方法
介绍 表1. 实验使用的材料。
多能性干细胞( PS Cs )是基础研究和应用的基本工 产品名称 货号
具，包括再生治疗、药物开发和毒理学评估。尽管 Alexa Fluor® 488山羊抗小鼠lgG (H+L) A11029
®
Alexa Fluor 山羊抗兔lgG (H+L) A11012
无滋养层系统的问世大大提升了PSCs的可扩展性，
DPBS ，不含钙和镁(10X) 14200-075
但细胞团块传代技术(如使用分散酶、胶原酶或EDTA ™
Essential 8 培养基 A1517001
等试剂)通常不适用于下游实验应用，如高通量筛 ® ™
Gibco RevitaCell 添加剂(100X) A 2644501
选、基因编辑和定向分化。 Image-iT® 固定/透化试剂盒 R37602
小鼠抗Tra-1-81 (cl.26) 41-1100
单细胞培养是干细胞培养研究中的标准和惯常方 PSC冻存培养基 A 2644401
法。通过利用单细胞解离传代技术，科学家们能够 StemPro® Accutase® 细胞消化液 A11105-01
截短型重组人玻连蛋白(VTN-N) A14700
获得值得信赖的细胞用于下游应用和克隆筛选、成
™
Try pLE Select 酶，不含酚红(1X) 12563-029
像和细胞分选比较，也可用于对细胞复苏和细胞数
量要求很高的悬浮培养。Gibco® RevitaCell™添加剂
使用Try pLE™ Select酶或StemPro® ®
可与Essential 8™培养基结合使用，用于单细胞传 Accutase 细胞
代时可实现最大的细胞存活率。与其他商品化的配 消化液进行hiPSCs单细胞传代
方不同，Rev itaCell™添加剂包括rho相关蛋白激酶 对于单细胞传代实验(参考图1 中的工作流程) ，使
(ROCK)抑制剂，其选择性优于传统的ROCK抑制剂 用不含钙和镁的DPBS冲洗细胞，然后使用预热的
(如Y -27632和thiazov iv in) ，可与包含抗氧化剂和具 Try pLE™ Select酶(1 mL每6孔板的一个孔)进行处
有自由基清除剂特性的分子结合使用。这种混合
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