总酚含量及多酚氧化酶活性与岩黄连愈伤组织褐化的-中国作物学会.pdfVIP

总第170期 149 作物杂志 Crops 2016（1）：149-153 DOI：10.16035/j.issn.1001-7283.2016.01.028 总酚含量及多酚氧化酶活性与岩黄连 愈伤组织褐化的相关性研究 岑忠用 苏 江 邓晰朝 谢彦军 ( 河池学院化学与生物工程学院，546300，广西宜州 ) 摘 要 以未褐化的岩黄连愈伤组织为材料，于培养基中添加不同浓度的抗坏血酸，研究抗坏血酸对岩黄连愈 伤组织褐化及总酚含量和多酚氧化酶活性的影响。结果表明：在培养第 20 天，各处理岩黄连愈伤组织的褐化 率均低于对照；各处理的多酚氧化酶活性均高于对照，其中抗坏血酸浓度 175mg/L 的处理多酚氧化酶活性最高， 为 14.1400U/(g·min)，比对照高 72.3%；各处理的总酚含量均低于对照，抗坏血酸浓度为 175mg/L 的处理总酚 含量最低，为 0.4633µg/mL，比对照低 88.3%。相关性分析结果表明，岩黄连愈伤组织褐变率与总酚含量呈正 相关，与多酚氧化酶活性呈负相关；而岩黄连愈伤组织多酚氧化酶活性和总酚含量呈极显著负相关。 关键词 岩黄连；愈伤组织；褐化；总酚；多酚氧化酶 岩黄连（Corydalis saxicola ）是一种珍贵的中 目前，关于岩黄连愈伤组织的褐化与 PPO 活 草药，长期以来由于大量采挖和收购，导致岩黄 性和总酚含量的关系的研究尚未见报道。本研究 连野生资源日益匮乏 [1] 。因此，如何保护岩黄连 以抗坏血酸为抗氧化剂，研究不同浓度的抗坏血 野生资源，加快岩黄连药源生产，促进其相关产 酸对岩黄连愈伤组织褐化、总酚含量和 PPO 活性 业可持续发展已迫在眉睫。利用组织培养技术， 的影响，拟通过抗氧化剂抗坏血酸减缓岩黄连愈 进行工厂化育苗，被认为是解决岩黄连快速繁殖 伤组织褐化，为解决其组织培养过程的褐化问题 的重要途径 [2] 。在岩黄连的组织培养过程中，其 提供参考。 愈伤组织的诱导和产生是一个重要的阶段，但研 究发现在岩黄连愈伤组织培养过程中常发生严重 1 材料与方法 的褐变现象，严重阻碍岩黄连愈伤组织的生长和分 1.1 试验材料 化，甚至导致其死亡。研究认为褐变发生的原因与 试验所用的岩黄连愈伤组织由河池学院植物 外植体、继代的愈伤组织中所含酚类化合物的多少 [3-7] 组织培养实验室提供。 和多酚氧化酶（PPO）活性有直接关系 。郑超 [8] 1.2 试验设计 等 在研究曼地亚红豆杉的组织培养时发现其愈 试 验 于 2014 年 进 行。 以 配 方 1/2 MS+TDZ 伤组织褐化程度与总酚含量呈显著正相关 , 而总酚 含量与 PPO 活性则呈负相关。戴勤等 [9] 在擎天树 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+BA 0.1mg/L 为 培 养 基， 分 的组织培养研究中发现其外植体总酚含量和褐变 别 以 75、125、175 和 225mg/L 的 抗 坏 血 酸 添 加 程度呈显著的正相关 , 赵滢等 [10] 在研究蝴蝶兰组 于培养基中，以不添加抗坏血酸的培养基为对 织培养过程中发现总酚含量与 PPO 活性呈正相关。 照。以下各处理分别以对照、75mg/L、125mg/L、 郑颖等 [11]