铜绿假单胞菌单细胞与群体细胞生长规律模拟与验证-农业机械学报.pdfVIP

２０１４年９月 农 业 机 械 学 报 第４５卷 第９期 ｄｏｉ：１０．６０４１／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００１２９８．２０１４．０９．０３３ 铜绿假单胞菌单细胞与群体细胞生长规律模拟与验证 １ １ ２ １ １ 董庆利　王　忻　丁　甜　刘　箐　刘阳泰 （１．上海理工大学医疗器械与食品学院，上海２０００９３；２．浙江大学生物系统工程与食品科学学院，杭州３１００５８） 摘要：采用单细胞生长流动成像系统，观测并探究铜绿假单胞菌单细胞生长规律，运用随机建模的方法构建单细胞 与群体细胞之间的关系，模拟铜绿假单胞菌群体细胞的生长并进行验证。同时，通过多次模拟实验来探究不同初 始接菌量对铜绿假单胞菌细胞生长迟滞期的影响。结果表明，在２５℃和３５℃条件下，模拟曲线基本能够呈现实际 测得群体细胞生长的趋势，模拟方法可以用来实现对群体细胞生长的预测。同时，对初始接菌量为０、１、２、４、８、１６ 和１００个／ｍＬ的铜绿假单胞菌生长进行多次模拟表明，在２５℃和３５℃下，其生长迟滞时间随初始接菌量的增大分 别由１２５２ｈ降低为６３３ｈ，由８６１ｈ降低为４０１ｈ。通过单细胞水平模拟群体细胞生长过程，能够更加明显地体 现出细菌细胞生长过程中的不确定性与变异性，为深入研究细菌细胞生长迟滞现象以及准确预测微生物的生长提 供借鉴。 关键词：铜绿假单胞菌　单细胞　迟滞期　流动成像系统　预测微生物学 中图分类号：ＴＳ２５１５；Ｏ９３５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００１２９８（２０１４）０９０２０４０６ ［１１］ 长迟滞时间极易受到环境变化的影响 ，其本身生 　　引言 长繁殖也存在变异性，单细胞微生物生长的不确定 铜绿假单胞菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓＡｅｒｕｇｉｎｏｓａ）是肉类 性与变异性又会对群体细胞的生长产生影响。因 食品中的优势腐败菌之一，能够引起肉制品发 此，从单细胞水平预测群体细胞的生长显得尤为重要。 ［１］ 粘 ，导致食品腐败。准确预测并抑制肉制品中铜 本文采用单细胞生长流动成像系统，对铜绿假 绿假单胞菌的生长对肉制品保鲜或食品货架期延长 单胞菌单细胞生长进行监测与分析，并建立单细胞 ［２］ 具有重要意义。董庆利 等通过研究温度、ｐＨ值 与群体细胞生长规律之间的关系，从而通过单细胞 和乳酸钠（ＮａＬ）浓度对铜绿假单胞菌迟滞期的影 水平预测群体细胞生长过程，为深入研究细菌细胞 响，建立了铜绿假单胞菌的一级生长模型和二级主 生长迟滞现象以及准确预测微生物的生长提供借 参数模型，从而获得铜绿假单胞菌生长的相关生长 鉴。 参数，为预测和控制铜绿假单胞菌生长提供理论参 １　材料与方法 考。 运用预测微生物学的方法，从群体细胞水平构 １１　实验材料、试剂与设备 建生长模型来预测微生物生长规律已是较为成熟的 １１１　菌株来源及菌悬液制备 手段，而许多学者逐渐认识到食品污染通常是由很 铜绿假单胞菌分离自市售冷鲜猪肉中，实验时 少的细菌菌落引起的［３－５］。因此，基于单细胞水平 进行平板划线，在２７℃下活化３次，选择性培养基 的微生物动力学研究已逐渐成为预测微生物学研究 的配置参照文献［１２］。取一环菌苔接种于１００ｍＬ ［６－８］ ［９］ 的热点之一 。Ｅｌｆｗｉｎｇ 等搭建了单细胞生长流 的磷酸盐缓冲液（ＰＢ