葡萄籽提取物由原花青素-植物提取物.pdfVIP

葡萄籽提取物中原花青素含量的最佳测定方法 电话：029西安) 020广州) 网址： 葡萄籽提取物由原花青素、儿茶素、表儿茶素、没食子酸等多酚类物质组成的，由 于原花青素的成分极其复杂，目前的研究实验中还无法提供原花青素的标准品，因 此Bate-Smith和Porter法只能测定葡萄籽提取物中原花青素的相对含量。 一、Bate-Smith法、Porter法测定葡萄籽原花青素含量 究： （一）Bate-Smith法测定葡萄籽原花青素含量 由于目前没有原花青素的标准品，因此此方法测定的只是葡萄籽提取物中原花青素 的相对值，其含量用原花青素指数(procyanidolic index)来表示。 【Bate-Smith法原理】原花青素在酸性条件下加热转化为红色的花青素(图1)。 ±1下反应40min后，取出迅速冷却，在550nm处测定其吸光度，以甲醇代替提取物 溶液作为空白。 原花青素指数=A×7.0/W W:样品质量(g)； A:吸光度 也可能大于100。因此，目前很多植物提取物生产厂家使用原花青素指数来表示葡 页面 1 / 7 葡萄籽提取物中原花青素含量的最佳测定方法 电话：029西安) 020广州) 网址： 萄籽提取物中原花青素的百分含量，是不正确的。 （二）Porter法测定葡萄籽原花青素含量 加了Fe3+，以提高反应的程度和颜色的稳定性。此方法测定的也是原花青素的相对 含量，结果用PVU(porter value unit)表示。 2.0%硫酸铁铵溶液(用2mol.L-1的盐酸溶解),在97℃ 作为空白。 PVU=A×7.2/W W:样品质量(g)； A:吸光度 美国葡萄籽方法评定委员会认为葡萄籽提取物的PVU在250～350之间是比较理想的 。 PVU过高，说明该产品中高聚体原花青素含量较高； PVU过低，可能说明该产品中原花青素的含量较低。 U=300，则该产品可能是低聚体原花青素含量较多，也可能是单体和高聚体原花青 素含量较多。 （三）Bate-Smith法和Porter法测定葡萄籽原花青素含量实验结论 PVU值无法明确是葡萄籽提取物中高聚体原花青素含量还是原花青素的含量。因此 页面 2 / 7 葡萄籽提取物中原花青素含量的最佳测定方法 电话：029西安) 020广州) 网址： 上述两种方法不能都作为葡萄籽提取物中总多酚或原花青素的定量分析方法。   据此实验结论，西安源森生物实验室另辟蹊径，探索出一种新的测定葡萄籽原花青 素含量的方法——Folin-Ciocalteau法与HPLC 相结合法： 由于葡萄籽提取物由原花青素和几种单体组成，因此原花青素的含量可用葡萄籽提 取物中总多酚的含量减去其中单体含量求得。葡萄籽提取物总多酚含量可采用Folin 测定。因此，本 次实验中，西安 源森生物实验室 采用Folin-Ciocalt eau法和HPLC 相结合的方法来测定葡萄籽提取物中原花青素的含量。   二、Folin-Ciocalteau法与HPLC 相结合测定葡萄籽提取物中原花青素含量 【实验步骤】 (一)实验条件 1. 材料 葡萄籽提取物:西安源森生物科技有限公司实验室专项制备 2. 仪器和试剂  ODS 150mm×4mm,5μm。 （2） Folin-Ciocalteau试剂 （3） 没食子酸，儿茶素，表儿茶素标准品； 表儿茶素没食子酸酯； 乙睛。 3.