Sestrin2在miR-19诱导的非小细胞肺癌细胞上皮-间质转化中的表达及六神丸干预研究.pdfVIP

国际医药卫生导报2017年第 23卷第 5期 IMHGN，March2017，Vo1．23 No．5 · 科研课题 · Sestrin2在 miR一19诱导的非小细胞肺癌 细胞上皮 一间质转化中的表达及 六神丸干预研究 鄢文 靳文 王昂 宋维舒 510317 广州，广东省第二人民医院肿瘤一科 通信作者：鄢文，E—mail：jinwen020@126．com DOI：10．3760／cma．j．issn．1007—1245．2017．05．003 【摘要 】 目的 探讨Sestrin2在六神丸调控miR一19诱导的非小细胞肺癌细胞上皮一间质转化 (epilhelial—mesenehymaltransition，EMT)中的作用。方法 实验分为对照组、miR～19过表达组 、六神丸 组。对照组为常规血清培养的A549细胞；miR一19过表达组为常规血清培养的过表达 miR一19A549细胞； 六神丸组予以六神九含药血清干预过表达miR一19A549细胞。48h后分别以CCK一8检测 A549细胞增殖 ， Transwell小室检测A549细胞迁移能力，实时荧光定量PCR (quantitativeReal—timePCR，qRT—PCR)检 测miR一19表达 ，蛋 白印迹检测 Sestrin2、PTEN以及 EMT标记分子E—eadhefin、Vimentin的表达。结果 细胞计数试剂盒一8(cellcountingkit一8，CCK一8)检测结果显示 ，六神丸组 A549细胞增殖速度较对照 组、miR～19过表达组明显减慢；Transwell小室实验显示 ，六神丸组A549细胞迁移数量较miR一19过表达 组、对照组明显减少；qRT—PCR检测结果显示 ，六神丸组A549细胞 中miR一19表达较miR一19过表达组、 对照组明显降低 ；Westernblot检测结果显示 ，与对照组、miR一19过表达组相比，六神丸组A549细胞 中 Sestrin2、E—cadhefin、PTEN表达明显上调，Vimentin表达明显下调。结论 六神丸能够抑制miR一19诱 发的人肺腺癌细胞株A549发生EMT，与激活Sestrin2信号通路有关。 【关键词】 六神丸；上皮一间质转化；Sestrin2；miR一19 基金项目：国家自然科学基金资助项 目 StudyOHexpressionofSestrin2inepithelial—-mesenchymaltransitionofnon-·smallcelllungcancercells inducedbymiR-19andinterventionofLiushenpills YahWen．JinWen．WangAng,songWeishu FirstDepartment Oncology,GuangdongNo．2ProvincialPeople Hospital,Guangzhou510317，China Correspondingauthor：YanWen，E-mail．jinwen020@126．com 【Abstract】 Objective ToinvestigatetheroleofSestrin2intheregulationofmiR一19-induced epithelial—mesenchymaltransition(EMT)innon·smallcelllungcancercells．Methods Theexperimenthada controlgroup，anmiR一19overexpressiongroup，andaLiushenpillsgroup．Thecontrolgroupwasnormalserum— culturedA549cells，themiR-19overexpressiongroupwasnormalserum—culturedmiR一19overexpressingA549 cells，andtheLiushenpillgroupwasLiushenpills—containingserum ·culturedthemiR一19overexpressionof A549cells．CCK一8wasusedtodetectA549cellproliferation，TranswellchamberwasusedtodetectA549cell