Spink8基因对EC9706细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响.pdfVIP

· 568 · 郑州大学学报 (医学版) 2016年9月 第 51卷 第 5期 doi：10．13705／j．issn．1671-6825．2016．05．003 Spink8基因对 EC9706细胞增殖 、凋亡及迁移能力的影响 孙 艳，，张 华 ，封青川¨，汜．．14-玉佳¨，李 涛¨，张玉超¨，贺 颖¨，郑 红 1)郑州大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系 郑州 450001 2)河南省中医药大学第一附属 医院生殖医学科 郑州 450003 3)郑州市妇幼保健院优生科 郑州 450012 社通信作者，女，1966年3月生，博士，教授 ，研究方向：遗传性疾病的致病基因的筛选与研究，E—mail：hzheng@ZZU．edu．an 关键词 Spink8基因；食管癌细胞；增殖 ；凋亡；细胞迁移 中图分类号 R735．1 摘要 目的：探讨 Spink8基因对人食管癌 EC9706细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法：利用DNA重组技 术构建 Spink8真核表达重组质粒并转染 EC9706细胞 ，构建稳定表达 Spink8的EC9706细胞。取未转染、转染空质 粒和稳定表达 Spink8的EC9706细胞 ，采用RT—PCR和Westernblot法检测 Spink8mRNA和蛋 白，MTT法检测细胞 增殖 ，AnnexinV—APC／7一AAD法检测细胞凋亡 ，并进行 Transwell细胞迁移实验 。结果：与未转染和转染空质粒组细 胞比较，稳定表达 Spink8的EC9706细胞增殖受到抑制 (P0．05)，增殖抑制率为 24．5％；细胞凋亡率增加 (P 0．05)；Transwell小室穿膜细胞数减少 (P0．05)。结论 ：Spink8可能是一个新的抑癌基因。 Effects of Spink8 gene on proliferation，apoptosis and migration of EC9706 cells SUN Yah’，ZHANGHua ，FENGQingchuan“，FAN Yujia”，L1Tao¨，ZHANG Yuchao”，HE Ying¨ ZHENG Hong ) ， J)DepartmentofMedicalGeneticsandCellBiology，CollegeofBasicMedicalSciences，ZhengzhouUniversi- ty，Zhengzhou450001 2)DepartmentofReproductiveMedicine，theFirstAffiliatedHospital，HenanUni一 e 钞ofTraditionalChineseMedicine，Zhengzhou450003 3)PrepotencyDivision，WomenandInfants HospitalofZhengzhou，Zhengzhou450012 Keywords Spink8gene；esophagealcancercell；proliferation；apoptosis；cellmigration Abstract Aim ：ToinvestigatetheeffectsofSpink8geneonproliferation，apoptosisandmigrationofhumanesopha— gealcancercellEC9706．Methods：EukaryotieexpressionplasmidpEGFP—Spink8wasestablishedbyDNArecombination invitro，and transfected intoEC9706 cells．TheexpressionsofSpink8mRNA andproteinwereexaminedbyRT—PCR and 河南省医学科技攻关计划 201303001 (11)：2102 巴结转移及其影响因素与生存期的关系[J]．肿瘤防治 [5]MATSUMOTOT，FUJIIH，ARAKAWAA，eta1．Lossof 研究 ，2014，41(3)：221 heterozygosity