Wnt因子联合BMP-7诱导BMSCs向成骨分化的研究.pdfVIP

第 35卷 第 1期 石河子大学学报 ：自然科学版 Vo1．35 No．1 2017年 2月 JournalofShiheziUniversity：NaturalScience Feb．2017 DOI：IO．13880~．cnki．65-1174／n．2017．01．019 文章编号：1007—7383(2017)01—0l13—06 Wnt因子联合BMP一7诱导BMSCs 向成骨分化的研究 阿勒泰别克 ·闹乎旦 ，张玉玲 ，白广超 ，金洪亮 ，李宽新 术 (1新疆兵团医院关节脊柱外科，新疆 乌鲁木齐 832000；2新疆兵团医院教学科，新疆 乌鲁木齐 830000) 摘要：为了观察Wnt联合 BMP诱导骨髓间充质干细胞向成骨方向分化是否具有协同作用 ，本研究以密度梯度离心 联合贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞；实验分组为：对照组 、Wnt组、BMP一7组 、Wnt和BMP一7联合诱导组；以 CCK一8法检测细胞 的增殖活性 ；定量测定碱性磷酸酶(ATJP)活性 ；以RT—PCR技术检测特异成骨转录 因子的表达情 况 ；使 VonKossa染色法观察细胞 内矿化沉积程度。结果显示 ：以CKK一8法测培养第 7天时联合组吸光度值为 0．847，Wnt组为 0．739，均明显高于对照组 0．408，差异具有显著性(P0．05)；联合诱导组的ALP活性 比值在培养第 6天和第 l2天时分别为 63．9和 144．4，BMP一7组分别为40．9和 104．2，均明显高于对照组的7．2和 18．8，差异具有 统计学意义(190．05)；培养 14 d后 ，OCN、B—Catenin的相对灰度值联合组高于对照组 ，差异具有统计学意义 (P 0．05)，而 Runx2及 Osterix的表达量各组间差异无统计学意义 ；培养 3周后 ，以VonKossa染色后观察到钙结节在大 小和数量上联合组均大于对照组。由此可知 ，Wnt3a因子和BMP一7联合可促进骨髓间充质干细胞的成骨分化 ，且两 者具有协 同作用 。 关键词 ：Wnt3a；BMP一7；骨髓 间充质干细胞 ；成骨分化 中图分类号：R285 文献标志码 ：A Study on induction ofbonemarrow mesenchymalstem cells intoosteoblasts by combination ofW ntfactorand BM P-7 AletaibiekeNaohudan，ZhangYuling2，BaiGuangchao，JinHongliang，LiKuanxin (1DepartmentofJointandSpinal，XinjiangProductionandConstructionCorpsHospital，Urumqi，Xinjiang830000，China； 2DepartmentofScienceandEducation，XinjiangProductionandConstructionCorpsHospital， Uurmqi，Xinjiang830000，China) Abstract：To observethesynergisticeffectofWntcombinedwith BMP onosteogenic differentiation ofbone marrow mesenchymal stem cells．isolated cuhurewas performed on MSCsby density—gradientcentfifugation combined with adherence method．The controlgroup，Wntgroup，BMP一7 group，Wnt—BMP一7 combined induction group weredefined．The cellproliferativeactivitywas