仿生BCP组织工程骨块重建股骨头骨缺损区的实验研究.pdfVIP

全国髋关节及周围神经外科学术研讨会 A专家讲座 仿生BCP组织工程骨块重建股骨头骨缺损区 的实验研究 北京解放军总医院骨科 卢世壁 necrosisofthefemoral 股骨头缺血性坏死(Avascular head，ANFH)是骨科临床上常见 的一种难治性疾病，多见于中青年。尽管治疗ANFI-I的方法很多，但仍有相当一部分病 例疗效欠佳，股骨头继续塌陷，最终导致患髋功能丧失。随着组织工程技术的出现、发展 和不断进步，以及生物力学研究的深入，为ANFtt的治疗带来契机。本研究依据生物力 学的研究成果，从组织工程角度出发，利用仿生技术制备骨组织工程支架，在体外构建骨 组织工程骨块，同时建立股骨头骨缺损模型，将构建的组织工程骨块植入骨缺损内，为组 织工程技术重建股骨头骨缺损进行初步尝试和探索性实验研究。 材料和方法 1．取向性股骨头仿生支架的制备 ， 收集正常犬股骨头样本，将样本置于Micro—CT系统(肛cT一40，SeancoMedical， 羟基磷灰石(Hydmxyapatite，HA)／13一磷酸三钙(B—triealcium 浆料的配方和加工工艺，利用凝胶叠层成型法(3D calcium 钙陶瓷(biphasie 的小梁结构具有一定的走向。 2．股骨头支架的空问结构评价 Micro—cT图像，平面图像分辨率1024×1024，像素点尺寸20x20p．．m，层间距201xm。图 像高斯滤波后，选区固定单一域值提取矿化骨小梁的图像信息，将图像二值化。用Micro Volume Fraction，BVF)；骨小梁间隙(Trabecular and NationalSeminarof Joint NerveDiseases Hip Periphery (Trkbeeular thickness，Tb．Th)以p．m表示；骨小梁数目(Trabecularnumber，Tb．N)以 smfaee／bone nlnl“表示u1；骨表面积体积比(Bone Model 型指数(Structure Pattern 板状结构的理论值是O)；骨小梁模型因子(TrabecularFactor，Tb．Pf)是一个表示 骨小梁连接性的参数。弛．Pf的值越小，表示骨小梁的连接性越好；各向异性程度(de． of grceanisotropy，DA)。 随后收集正常犬股骨头标本8个，用环钻钻取圆柱形骨块，按前述方法对犬股骨头 骨样本进行Micro—CT检查和结构分析。 3．仿生支架和松质骨样本的材料力学性能测试 858Mini 机(MTS BionixII，MTS 试。支架A组沿样本的长轴加压，支架B组垂直于样本长轴加压。计算支架长轴方向和 垂直于长轴方向的弹性模量和极限强度，与犬股骨头样本对比。 4．细胞在支架表面生长情况的观察 超声波清洗机内三蒸水反复清洗仿生BCP支架三遍后，烘干，。co照射消毒，备用。 将骨髓问充质干细胞(Bonemesenchymal 架，在条件培养液向成骨方向诱导培养2天后分别在倒置显微镜(OlympusIXT0，Japan) 和环境扫描电镜下(XL30一ESEM)观察细胞在支架小梁表面的生长情况。 5．动物实验观察 将骨髓间充质干细胞按6—8．0×106／ml的密度接种至支架，在条件培养液向成骨 方向诱导培养7天后备用。选取骨龄成熟普通杂种犬20只(解放军总医院动物实验 中心提供)，雌雄不分，体重14—16Kg，随机分为实验组和对照组，每组10只动物，麻 醉后，髋关节前侧人路显露股骨