拟南芥atvq29基因的克隆与植物表达载体构建-现代生物医学进展.pdfVIP

6814 现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine Vol.14 NO.35 DEC.2014 · · doi: 10.13241/j .cnki.pmb.20 14.35.004 拟南芥AtVQ29 基因的克隆与植物表达载体构建* 刘 清 唐 蛟 曾 娟 黄明亮 童建华 黄志刚 （湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室 湖南长沙4 10128 ） VQ 摘要 目的： 模序蛋白是 物中所特有的一类具有高度保守序列的蛋白质，广泛参与 物的生长发育与逆境反应，本研究拟克 AtVQ29 CaMV 35S pSN 1301-AtVQ29 ： CTAB 隆拟南芥的 基因并进一步构建由组成型启动子 驱动的 物表达载体 。方法 采用 法 提取拟南芥基因组DNA ，根据已报道的AtVQ29 基因序列设计并合成引物，通过PCR 技术扩增获得拟南芥AtVQ29 基因，经T 。 载体克隆 测序。利用生物信息学软件对序列进行初步分析，同时基于基因重组技术构建 物表达载体 结果：序列分析表明已 AtVQ29 372bp 123 VQ 成功克隆 基因，该基因编码区全长为 ，共编码 个氨基酸残基，具有保守的 模序。并进一步构建了由组成型 CaMV 35S AtVQ29 pSN 1301-AtVQ29 ： AtVQ29 启动子 驱动的 基因 物表达载体 。结论 本研究所构建的 基因 物表达载体能够 在转基因 株中过量表达AtVQ29 基因，为 期开展基因功能研究与 物基因改良奠定了基础。 AtVQ29 VQ 关键词： ； 模序蛋白；基因克隆； 物表达载体 Q785 A 1673-6273 2014 35-6814-04 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Cloning of Arabidopsis AtVQ29 and Construction of its Plant Expression Vector* VQ-motif proteins are found exclusively in plants and have a broad range of roles in plant growth, development and defense response. The study was aimed to clone AtVQ29 and construct plant expression vector pSN 1301-AtVQ29 drived by CaMV 35S promoter. The genome DNA of Arabidopsis thaliana was extracted with CTAB method. Based on the reported AtVQ29 sequence, primers were designed to amplify AtVQ29. After T-vector cloning and sequencing, preliminarily bioinformatics analysis was ma