玉米转录因子zmbhlh5的分离序列分析及原核表达-上海大学.pdfVIP

第 19 卷 第 6 期 （自然科学版） Vol. 19 No. 6 2013年12月 JOURNAL OF SHANGHAI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE) Dec. 2013 DOI: 10.3969/j.issn.1007-2861.2013.06.014 玉米转录因子 ZmbHLH 5 的分离、序列分析及原核表达 王 芳, 钟鸣宇, 宋任涛, 许政暟, 王桂凤 (上海大学 生命科学学院 上海市能源作物育种及应用重点实验室, 上海 200444) 摘摘摘要要要: 以玉米籽粒发育特异 cDNA 文库 的表达序列标签(expressed sequence tag, EST)为基础, 成功克隆了 1 条 全长碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix, bHLH)转录 因子ZmbHLH5, 并对其 DNA 结构、编码 的蛋白质序列 和表达进行 了分析. 结构分析表 明, ZmbHLH5 的 cDNA 全长 1 398 bp, 具有编码 211 个氨基酸的开放阅读框(open reading frame, ORF)区、329 bp 的 3 非翻译区(untranslated regions, UTR)及 433 bp 的 5 非翻译区. 蛋 白序列分 析结果表 明, ZmbHLH5 包含典型的 60 个氨基酸 的 bHLH 结构域, 与其他植物 的 bHLH 转录 因子具有很高的同源 性(68%∼87%). 表达分析结果表 明, ZmbHLH5 在雌穗和发育早期的籽粒 中高丰度表达, 并且在籽粒 中通过选择性 剪接编码至少 3 种完整蛋 白. 在原核表达系统 中成功诱导表达 了融合蛋 白 GST-ZmbHLH5, 其分子量大小为 58 kD, 与预测的蛋白分子量大小一致. 关关关键键键词词词 : 玉米 ；转录因子ZmbHLH5 ；选择性剪接 ；蛋 白表达 ；籽粒 中中中图图图分分分类类类号号号 : TU 411 文文文献献献标标标志志志码码码 : A 文文文章章章编编编号号号 : 1007-2861(2013)06-0623-08 Isolation, Sequence Analysis and Prokaryotic Expression of a Putative Transcriptional Factor ZmbHLH 5 from Maize (Zea mays) WANG Fang, ZHONG Ming-yu, SONG Ren-tao, XU Zheng-kai, WANG Gui-feng ( Shanghai Key Laboratory of Bio-energy Crops, School of Life Sciences, Shanghai University, Shanghai 200444, China) Abstract: Based on expressed sequence tags (ESTs) isolated from the cDNA library of maize developing kernels, a full-length putative basic helix-loop-helix (bHLH) transcription factor, named ZmbHLH 5 was cloned successfully. Sequence analysis showed that ZmbHLH 5 cDNA