不同程度间歇低氧对小鼠肺成纤维细胞活化和胞外基质分泌的影响.pdfVIP

天津医药2017年1月第45卷第1期 9 细胞与分子生物学 不同程度间歇低氧对小鼠肺成纤维细胞活化和 胞外基质分泌的影响 李菲 ，李莲 ，任方元 ，姜芳馨 ，冯靖 ，陈宝元 ，曹洁 摘要 ：目的 探讨不同程度间歇低氧 (IH)对MLg小鼠肺成纤维细胞活化和胞外基质分泌的影响。方法 取对 数生长期的MLg成纤维细胞，IH分别处理 1h,4h、8h(IH1组、IH4组、IH8组)，IH频率为5％0：100S，21％0120S， 并设置常氧对照组(21％O处理8h，N组)。实验结束后收集细胞，采用 qRT—PCR和Westernblot检测各组 肌动 蛋白(仪一SMA)、I型胶质蛋 白(COL1)mRNA和蛋白表达水平。结果 IH1组 、IH4组、IH8组 一SMA、COL1mRNA 及蛋白的表达水平明显高于 N组(P0．05)，且随着 IH时间的延长 ，一SMA、COL1表达水平逐渐升高。结论 IH 可以促进小鼠肺成纤维细胞活化和胞外基质分泌，其作用机制可能与氧化应激有关。 关键词：缺氧；成纤维细胞 ；细胞外基质；胶原 I型；肌动蛋白类；睡眠呼吸暂停，阻塞性 ；肺纤维化 中图分类号：R563，R34 文献标志码：A DoI：10．11958 Effectsofdifferentdegreesofintermittenthypoxiaontheactivationandtheextracellularmatrix secretionofmouseIungfibroblastcells LIFei，LILian，RENFang—yuan，JIANGFang—xin，FENGJing，CHENBao～yuan，CAOJie jDepartmentofRespiratory,TianjinMedicalUniversityGeneralHospital，Tianjin300052，China； 2CollegeofLifeSciences，NankaiUniversity CorrespondingAuthor E-mail：咖aojie@sina．com Abstract：Objective Toexploretheeffectsofdifferentdegreesofintermittenthypoxia(IH)ontheactivationandthe secretionofextracellularmatrixinMLglungfibroblastcellline．M ethods MLglungfibroblastcellsinlogarithmicgrowth phasewereexposedfor5％O2ofr100secondsand21％02for120secondsin1h，4hand8hrgoups(IH1，IH4andIH8) andnormoxiagroupf2l％02ofr8h，Ngroup)．Thecellsineachgroupwerecollectedattheendofexperiment．Real—time PCRwasusedtomeasurethemRNAexpressionlevelsof0一【SMAandtypeIcollagen(COL1)A1，andWesternblotassay wasusedtodetecttheproteinexpressionlevelsof0一【SMA andCOL1．Results ThemRNA andproteinexpressionlevelsof Or．一SMA andCOL1weresignificantlyincreasedinIH1，I