单克隆抗体疾病诊断课件.pptVIP

单克隆抗体 中文名称： 单克隆抗体 英文名称： monoclonal antibody;McAb;mAb 定义1： 高度均质性的特异性抗体，由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。一般来自杂交瘤细胞。 应用学科： 免疫学（一级学科）；免疫系统（二级学科）；免疫分子（三级学科） 定义2： 只识别一种表位(抗原决定簇)的抗体，来自单个Ｂ淋巴细胞的克隆或一个杂交瘤细胞的克隆。 应用学科： 生物化学与分子生物学（一级学科）；总论（二级学科） 定义3： 由单一杂交瘤细胞克隆分泌的只能识别一种表位（抗原决定簇）的高纯度抗体。 应用学科： 细胞生物学（一级学科）；细胞培养与细胞工程（二级学科） What单克隆抗体 动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞（浆细胞）和记忆B细胞，大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分布到血液、体液中。如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体。 How制备单克隆抗体 单克隆抗体的提纯＆保存 一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A－琼脂糖4B亲和层析法。 　　单克隆抗体的保存 由腹水中获得的抗体,经离心去除细胞成分，再经冷冻超速离心,取上清液加0.1％NaN3，少量分装，冷冻于-70℃可保存几年。 但应避免反复冻融,否则抗体失活，特别是IgM抗体。提纯的单克隆抗体,冷冻干燥保存于2～8℃，取出时溶解后，保存于2～8℃，至少一个月内可保持稳定。腹水抗体也可冷冻干燥低温(4℃)保存两年，融化后放置4℃下保存一个月。短期使用的腹水抗体，4℃3～4 个月仍保持稳定, 培养上清加0.1％NaN3，贮于-20℃，两年不失活性。 单克隆抗体的应用 检验医学诊断试剂 蛋白质的提纯 小分子抗体的应用 抗体融合蛋白的应用 双特异抗体的应用 检验医学诊断试剂 病原微生物抗原、抗体的检测 肿瘤抗原的检测 免疫细胞及其亚群的的检测 激素测定 细胞因子的测定 成就 国外： 自1975年建立B淋巴细胞杂交瘤制备McAb成功以来，到现在的近30年间，又做了大量的工作，并取得了明显的进展。美、英、日、法等国于1978年起先后建立了McAb公司100多家，并于1979年将第一个杂交瘤产品供应市场，现已有几十种杂交瘤细胞株和几百种McAb商品化，投入市场。现在全世界已有1 000多个实验室从事这方面的研究工作，并形成一股McAb“生产热”，估计全世界研究建立的杂交瘤细胞株数已达5万种以上。为交流总结McAb的研究工作经验，在法国Bussard教授的倡议下，组成了“国际杂交瘤细胞专家委员会”，附属在国际免疫学会中；还建立了一个“国际杂交瘤细胞及其产物McAb资料数据库”，专门搜集有关杂交瘤细胞的信息，并回答各种咨询。 国内： 1. 至今，国内外报道的动物用单抗已达数百种，据不完全统计，其中针对畜禽病原体的有163种，几乎包括了国内外严重流行的大多数传染病和寄生虫病。另有36种分别针对14种动物(包括人)的免疫球蛋白单抗，另外57种分别是针对动物激素、独特型和动物组织抗原等的单抗。这些单抗试剂主要用于下列几个方面：①用于生物医学各学科的基础研究；②用于疾病的诊断、检疫及流行病学研究；③用于疾病预防与治疗；④用于生物活性物质的提取；⑤用于妊娠诊断，性别鉴定和鉴别控制，促进畜禽生长，提高家畜繁殖力等。 我国动物用单抗的研究发展亦很快，取得了多项研究成果，有的已在较大范围推广应用，获得了显著的经济效益和社会效益，如马传染性贫血单抗诊断试剂盒和旋毛虫单抗快速ELISA诊断试剂盒，另有10多种单抗试剂盒已完成或即将完成开发研究。 动物用单克隆抗体的发展前景 First.动物用McAb必须走向产业化今后动物用单抗的研究重点应放在产业化上，将现有成果转化为生产力。目前，我国动物用单抗的成果大多数还没有产业化，其实现产业化的进程总体上很缓慢。为此，要加速这一进程，下列几点必须引起重视。要突破“单抗建株、鉴定”的研究框架，从研究工作开始，就应着眼其应用价值，这一问题主管部门和研究人员都要重视。在很多方面，单抗的应用要解决的技术问题更多更复杂，其所需的人力、物力、财力的投入亦较大。要选准产业化的目标，以点带面，上述数百种单抗其开发应用价值不尽一致，作为动物用单抗开发的产品，应具备一定的条件，以针对畜禽疾病单抗试剂为例，应包括单抗针对的疾病流行范围广、发病率高、经济意义大，或有重要的公共卫生意义；单抗能解决常规诊断试剂无法解决的问题，如在临床上区分强毒感染和疫苗毒感染所引起