低氮胁迫下MdCYS基因的表达分析.pdfVIP

ShaanxiJournalof Sciences 陕西农业科学2017，63(07)：44—49 Agricultural 低氮胁迫下MdCYS基因的表达分析 杨英丽。谭延肖。黄琳琳。高腾腾。赵琪，邹养军 (西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100) 摘要：为了初步探究cystatins(CYS)基因参与苹果氮胁迫的调控机制，以苹果矮化砧木M．26盆栽苗为试材， 分析低氮胁迫下M．26的生长量、总叶绿素质量分数、净光合速率的变化，并利用qRT—PCR技术分析苹果 CYS基因表达的变化。结果表明，低氮胁迫处理与正常对照组相比，低氮处理组的株高、茎粗、总叶绿素质量 CYS21和MdCYS26迅速响应低氮胁迫，表达量被显著上调。生理指标与MdCYS基因关联分析结果显示：苹果 CYS基因参与低氮胁迫应答，可能影响苹果对低氮胁迫的耐受性。 关键词：M．26；cystatins基因；表达分析；低氮胁迫 马铃薯中的研究表明：CYS基因介导了植物 0 引言 体内氮素的新陈代谢¨7j，氮属于植物的必需元 半胱氨酸蛋白酶是一类蛋白质水解酶，可以 素，是植物体内有机大分子物质的必需组分，参与 介导植物体内的蛋白质水解，对维持植物叶片氮 植物生长发育等重要生物学过程。通过低氮处 的分配利用极为重要…。半胱氨酸蛋白酶的活 理，初步探究了水稻CYS基因参与氮营养胁迫的 in— 生物学过程¨8|；豆类植物上通过转基因等手段， 性受半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cysteineprotease hibitors，CPIs)的调控。CPIs是一类蛋白超家族，揭示了CYS基因在低氮胁迫中的作用¨¨引。在 是半胱氨酸蛋白激酶的可逆抑制剂，广泛存在于 苹果中，鉴定出26个CYS基因，并研究发现苹果 动植物、昆虫及微生物中悼J。该蛋白超家族分为 CYS基因的表达受干旱‘23。、低温‘川、高温‘蚓、 ABA及氧化胁迫Ⅲ1等多种非生物胁迫诱导。然 Stefin、Cystatin、Kininogen和Phytocystatin亚家 族旧j。系统发生分析发现，植物中鉴定到的所有 而，有关CYS基因参与氮胁迫的研究，在苹果中 并未见报道。 的CPIs划分为Phytocystatin家族，一般称之为 苹果是世界四大水果之一，其繁殖方式主要 Phytocystatin(PhyCys)MJ。植物Cystatin(CYS)蛋 白含有4个保守区域：N末端的甘氨酸残基、 为嫁接繁殖。因此，苹果砧木在苹果生产中被广 LARFAVxEHN保守结构域、活性中心元件Qx． 26)是苹果生产中重要的 泛应用，M．26(Mailing VxG、C末端的色氨酸残基。这些保守结构区域砧木，对改善接穗的生物和非生物胁迫适应性起 可以直接与半胱氨酸蛋白酶的活性中心进行连 着非常关键的作用。笔者试验以苹果矮化砧木 接，使其催化活性受到破坏∞’4j。因此植物CYSM．26为材料，对低氮逆境胁迫下苹果的生物量、 基因可以通过与半胱氨酸蛋白酶的相互作用，来 叶绿素质量分数、光合速率进行分析；同时，根据 行使其生物学功能。在植物中，CYS基因主要参 Tan等旧到的研究选取6个苹果CYS基因(Md- 与调控种子萌发、发育、贮藏蛋白的调运bt61以及 细胞程序性死亡_刊等过程。此外，植物CYS蛋白MdCYS26)，分析其表达模式。通过二者的关联分 通过与半胱氨酸蛋白酶相互作用参与调控生