德宏州1608例女性HPV感染基因分型情况调查.docVIP

德宏州1608例女性HPV感染基因分型情况调查 　　[摘要] 目的 了解德宏地区女性宫颈感染高危人乳头瘤病毒（HPV）基因型的分布情况。 方法 采用PCR和分子杂交技术对1608例就诊女性进行HPV基因分型检测。 结果 1608例女性中HPV阳性651例，感染率为40.48%；其中HPV低危型感染71例，高危型感染580例，排在前5位的HPV高危基因型依次是HPV16（23.35%）、HPV58（15.36%）、HPV52（9.37%）、HPV33（7.22%）和HPV18（4.61%）。HPV高危基因型单一感染462例（70.97%），二重感染95例（14.59%），三重感染22例（3.38%）。在651例感染者中，HPV16单一感染152例，HPV16合并其他基因型双重和三重感染67例。感染年龄高峰在30～50岁。 结论 1608例筛查女性中，HPV感染率较高，达40.49%，以HPV16基因型为主。HPV分型检测对高危年龄段女性健康检查、预测病变进展、评估预后、指导治疗有重要价值。 [关键词] 人乳头瘤病毒；基因分型；PCR和分子杂交技术 [中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）10（b）-0161-03 人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是一组形态和基因结构相似，但致瘤表现不同的病毒，能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖，可引起人类上皮的良性和恶性肿瘤。不同HPV基因型的感染与女性宫颈疾病的发生、发展、转归有着不同程度的相关性[1]，特异性的HPV检测方法对预防和诊断HPV感染引起的相关疾病，特别是女性生殖道肿瘤的早期发现具有重要意义。本文采用PCR和分子杂交技术对本院妇科就诊的1608例疑似HPV感染的女性进行HPV基因分型检测，分析德宏州妇女HPV感染情况，现报道如下。 1 材料与方法 1.1 研究对象 2010年11月～2011年12月到本院妇科就诊的女性1608例，年龄17～76岁。 1.2 仪器与试剂 PCR扩增仪；分子杂交仪；HPV基因分型检测试剂盒（深圳亚能生物技术有限公司提供）。 1.3 实验方法 1.3.1 样本收集 实验样本由妇科医生采集，使用专用的宫颈刷采取宫颈口上皮细胞样本，放入装有专用细胞保存液的洗脱管中，沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断，旋紧管盖，作好标记送实验室检测。 1.3.2 样本处理 按试剂盒说明书进行处理：将洗脱管中的宫颈刷充分漂洗，涡旋震荡1 min，以带有相应试剂的1.5 ml微量离心管收集全部洗脱液，13 000 r/min离心10 min，弃上清液获得管底的沉淀细胞块。在离心管中加入50 μl裂解液，充分混匀，悬浮细胞沉淀，水浴煮沸10 min，13 000 r/min离心10 min，保留上清待用。 1.3.3 检测方法 按试剂盒说明书进行实验：检测步骤主要包括HPV病毒DNA提取→PCR扩增→膜杂交→洗膜 显色及结果判读。检测的23种基因型包括18种高危型（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83和MM4型）和5种低危型（HPV6、11、42、43、44）。 1.4 统计学处理 计算HPV不同基因型的感染率。 2 结果 2.1 1608例HPV基因分型的检测结果 1608例标本中共筛查出HPV阳性标本651例，阳性率为40.48%。651例HPV阳性标本中高危型580例（包括双重及多重感染118例），占89.09%；低危型71例（包括2例双重感染），占10.91%；另外51例低危型合并高危型多重感染。580例高危型中前5位的依次是HPV16（23.35%）、HPV58（15.36%）、HPV52（9.37%）、HPV33（7.22%）和HPV18（4.61%）。HPV高危基因型单一感染462例（70.97%），二重感染95例（14.59%），三重感染22例（3.38%），四重感染1例（0.15%）。在651例感染者中，HPV16单一感染152例，HPV16合并其他基因型双重和三重感染67例。见表1、图1。 2.2 年龄分组的检测结果 本实验将筛查女性分为6个年龄段进行分析，≤20岁、21岁～、31岁～、41岁～、51岁～、60岁。各年龄组HPV感染阳性率分别为0.56%、8.15%、17.16%、10.88%、3.30%、0.44%（表2、图2）。 3 讨论 HPV是一种具有种属特异性的嗜上皮病毒，属双链闭环的小DNA病毒，包含约8000个碱基对，其中包括8个早期开放读码框架（E1～E8）、2个晚期读码框