丙烯酰胺生殖毒性和发育毒性效应性生物标志物研究 research on biomarkers of effect of reproductive and developmental toxicity of acrylamide.pdfVIP

中国食物与营养2014，20(11)：9．13 F00dandNutdtioninChina 丙烯酰胺生殖毒性和发育毒性 效应性生物标志物研究 鲁静，周催，孙娜，王静，王翠艳，车会莲 (中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京100083) 摘要：目的：研究丙烯酰胺对机体造成的生殖毒性和发育毒性，并找出丙烯酰胺生殖毒性和发育毒l生的效应性生 还对精子畸形率和睾丸内抗氧化酶系统进行评价，通过研究丙烯酰胺在动物模型中产生的效应性生物标志物来评价其生 殖毒性。采用饮水给予怀孕第6d的孕鼠m0、1 重并每天监测其饮水消耗量，观察胎鼠身长、尾长和骨骼发育情况；对断乳后的幼鼠采用直接饮水接触丙烯酰胺， 在3一w每周处死部分幼鼠，对其脏器和血液进行分析，通过研究丙烯酰胺在动物模型中产生的效应性生物标志物 来评价其发育毒性。结果：丙烯酰胺显著增加了sD大鼠精子畸形率，显著降低了SD大鼠睾丸内抗氧化酶的活性； 同时，丙烯酰胺导致幼鼠尾长的发育异常，幼鼠的肝、肾、脾、甲状腺发生组织病变，骨骼畸形率显著增加。结论： 精子畸形率、睾丸内抗氧化物酶能够反应丙烯酰胺的生殖毒性，可作为丙烯酰胺生殖毒性的效应生物标志物；幼鼠 尾长、骨骼畸形、组织病理学改变可反应丙烯酰胺的发育毒性，可作为丙烯酰胺的发育毒性的效应生物标志物。 关键词：丙烯酰胺；生殖毒性；发育毒性；效应生物标志物 丙烯酰胺(acryl锄ide，从)对机体主要有生殖毒只、10w龄的雌性sD大鼠50只，适应性喂养3—5d， 性、发育毒性、神经毒性和基因毒性等毒性¨’21。丙烯 所有实验动物在sPF级动物房内饲养，饲喂基础维持饲 酰胺进入机体后，在细胞色素酶P450的催化下发生环料，自由摄食和饮水。 1．2主要试剂 氧化反应形成环氧丙酰胺(dycidarIlide，GA)p。，AA和 GA引起雄性动物的生殖行为、精子发生及生殖内分泌 丙烯酰胺、乙酸乙酯、氯化钠、甲醛、冰乙酸、 功能的变化而产生生殖毒性‘4…。从也是一种具有发育 2，4，6．三硝基酚、氢氧化钾、甘油(AR)、水合氯 毒性的物质，可以对发育过程中动物的血液循环系统和 醛、茜素红，均为分析纯，购于北京化工厂；环磷酰 骨骼发育产生毒性……。 生物标志物可分为接触性生物标志物、效应性生物 试剂盒、CAT试剂盒，购于上海易利生物技术有限公 标志物和易感性生物标志物，但三者之间并无严格的界 司；无水乙醚(分析纯)，购于天津市津东天正精细化 限‘61。生物标志物与AA在体内的吸收、分布及代谢密学试剂厂。 切相关，通过动物实验寻找可靠的生物标志物，进行快 2研究方法 速有效的检测，对AA的毒性评价有着重要的作用。本 文通过研究从在动物模型中产生的效应生物标志物来 2．1 丙烯酰胺生殖毒性及其生物标志物研究 评价AA的生殖毒性和发育毒性。 2．1．1 实验动物的处理 12w雄性SD大鼠(SPF级， 购于北京维通利华实验动物技术有限公司)50只，适 1材料和方法 应性喂养3d后，随机分为阴性对照组[cK，0n影 1．1 实验动物 (kg·d)，灌胃生理盐水)、阳性对照组[环磷酰胺， 12w龄雄性SD大鼠50只、low龄雄性SD大鼠25 基金项目：国家科技支撑计划课题“食品中热反应伴生危害物毒理学检测及风险评估关键技术研究”(项目编号：2012BAK0lB03)。 作者简介：鲁静(1988一)，女。硕士研究生，研究方向为食品毒理学。 通讯作者：车会莲(1卯7一)，女，博士，副教授、博士生导师，研究方向为食品过敏、食品毒理学研究。 万方数据 10 中国食物与营养 第20卷 d)、AA中剂量组(AA2，11．25m∥(kg·d)、AA低剂染色，光学显微镜进行病理组织学检查。 量组(从1，5．62