分子生物学 考试重点 考前必备.doc

分子生物学 第一章 1分子生物学的定义：从分子水平上研究生命现象的物质基础的学科。研究细胞的成分的物理，化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系，如遗传信息的传递，基因的结构，复制转录，翻译，表达调控和表达产物的生理功能，以及细胞信号的转导。 2分子生物学研究的三条原理：a构成生物体各类有机大分子的单体在不同的生物体中是相同的 b生物体一切有机大分子的构成都遵循共同的规则 c某一特定生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性。 3分子生物学研究的主要内容：a DNA重组技术；b基因表达调控的研究；c生物大分子的结构功能研究——结构分子生物学；d基因组，功能基因组与生物信息学研究； 4 DNA的英文全称：Deoxyribonucleic acid RNA的英文全称：ribonucleic acid 5染色体的定义：由脱氧核糖核酸、蛋白质和少量核糖核酸组成的线状或棒状物，是生物主要遗传物质的载体所谓的DNA的一级结构，就是指4种核苷酸的链接及排列顺序，表示了该DNA分子的化学构成。核小体是染色体的基本结构单位，由DNA和组蛋白(histone)构成，是染色质（染色体）的基本结构单位。DNA分子以左手的方式缠绕在组蛋白分子上，形成核小体结构…1.没有非编码区和内含子。2.是环状的DNA分子，裸露于拟核区域；而真核生物的DNA通常与蛋白质结合成染色体存在于细胞核中。3.原核生物的细胞质中还可能具有质粒，也是一种环状的DNA双链分子，能够自主复制并影响原核生物的性状，并遗传到下一代；真核生物中的DNA还可能存在于叶绿体和线粒体中，具有半自主性，可以进行复制、转录，称为细胞质DNADNA双链中含编码蛋白质序列的那条链，与模板链互补DNA双链中其序列与编码链或信使核糖核酸互补的那条链。在DNA复制或转录过程中，作为模板指导新核苷酸链合成的亲代核苷酸链。’序列 15蛋白质合成的生物学机制（重点看）：a氨基酸的活化；B翻译的起始；c 肽链的延伸；d肽链的终止；e蛋白质前体的加工； 16摆动学说：在密码子和反密码子的配对中，前两对碱基严格遵照配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子看，反密码子第一位为A或C时只能识别一种密码子，为G或为U时可以识别2种，为I时可以识别3种密码子 17比较原核生物和真核生物的核糖体组成： A原核生物的核糖体由约2/3的RNA及1/3的蛋白质组成，真核生物的核糖体中RNA占3/5，蛋白质占2/5；B原核生物与真核生物核糖体中大小亚基的沉降系数不一样；C原核生物与真核生物核糖体大小亚基的蛋白质种类组成不同 18什么是SD序列?其功能是什么？ 信使核糖核酸(mRNA)翻译起点上游与原核16S 核糖体RNA或真核18S rRNA 3′端富含嘧啶的7核苷酸序列互补的富含嘌呤的3～7个核苷酸序列(AGGAGG)，是核糖体小亚基与mRNA结合并形成正确的前起始复合体的一段序列。分泌蛋白新生肽链N端的一段氨基酸残基组成的肽段Polymerase Chain Reaction）技术原理：首先将双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子，DNA聚合酶以单链为模板利用反应混合物中的四种脱氧核苷酸合成新生的DNA互补链（整个PCR反应的全过程，即DNA解链（变性），引物与模板DNA结合（退火），DNA合成（链的延伸）） 3PCR筛选：PCR筛选的前提是已知足够的序列信息并获得基因特异性引物 例如：要从一个基因DNA文库筛选目的基因，首先将整个文库保存在多孔培养板上，用设计好的目的基因探针对每个孔进行PCR筛选，鉴定出阳性孔，把每个阳性孔中的克隆再稀释到次级孔板中进行PCR筛选，重复以上程序，一直到鉴定出目的基因对应的单个克隆为止 4核酸杂交法：培养基上的菌落(将硝酸纤维膜覆盖于菌落上)――移去醋酸纤维薄膜——蛋白酶处理，裂解，中和除细菌蛋白——８０度烘烤滤膜，固定ＤＮＡ于膜上——用３５ｐ标记探针杂交——排出阳性克隆于母版 ５ＳＮＰ（单核苷酸的多态性）概念：指基因组ＤＮＡ序列中由于单个核苷酸的突变而引起的ＤＮＡ序列的多态性 ６染色体ＤＮＡ同义位置上的每个碱基类型叫做一个等位点 ７基因分型：是利用数据库已有的ＳＮＰ进行特定人群的序列和发生频率的研究，主要包括：ａ基因芯片技术；ｂＴａｑｍａｎ技术；ｃ分子信标技术；ｄ焦磷酸测序法； ８蛋白质组概念：蛋白质组是指“由一个细胞或一个组织的基因组所表达的全部相应的蛋白质阐明生物体各种生物基因组在细胞中表达的全部蛋白质的表达模式及功能模式的学科。包括鉴定蛋白质的表达、存在方式(修饰形式)、结构、功能和相互作用等。蛋白质的修饰加工、转运定位、结构变化、蛋白质与蛋白质的相互作用、蛋白质与其它生物分子的相互作用等活动