外周血特异性肿瘤标志物mRNA表达在非小细胞肺癌微转移研究中的意义.pdfVIP

· 2386· 广东医学 2010年9月第31卷第 l8期 GuangdongMedicalJournal Sep．2010，Vo1．31，No．18 外周血特异性肿瘤标志物 mRNA表达在 非小细胞肺癌微转移研究中的意义米 路中，戚丽，李贵新，杨兆禄，杨金平 潍坊医学院附属医院肿瘤科(山东潍坊 261031) 【摘要】 目的 研究非小细胞肺癌 (NSCLC)患者外周血肿瘤标记物mRNA表达及联合检测的临床意义。方 法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT—PCR)检测47例NSCLC患者，26例肺 良性疾病患者及 13例健康对照者外周 血细胞角蛋白19(CK19)、癌胚抗原(CEA)、黏蛋白一1(MUCI)、肺特异性x基因(LUNX)mRNA的表达，分析它 们作为NSCLC患者微转移标志物与病理类型、分化程度、临床分期的关系。结果 47例NSCLC患者外周血 中 CK19、CEA、MUC1、LUNXmRNA的阳性率分别为38．3％、44．7％、61．7％、57．4％；在 良性肺疾病患者阳性率分别 为3．8％、l1．5％、0．0％、0．0％；健康组的外周血中没有四者的表达，差异有显著性；NSCLC组外周血CK19、 MUCl、LUNXmRNA阳性表达率在鳞癌和腺癌患者比较差异无显著性，而腺癌患者与鳞癌患者中的CEAmRNA 阳性率相比差异有显著性；MUC1、LUNXmRNA阳性率随分化程度升高而降低，差异有显著性，而CK19、CEAmR— NA与肿瘤分化程度没有相关性；随着临床分期的加重，CKI9、CEA、MUC1、LUNXmRNA阳性率均增高，而且， MUC1、LUNXmRNA阳性率差异有显著性。结论 (1)CEAmRNA在肺腺癌 中的表达明显高于肺鳞癌，说明其对 判断病理类型有一定意义；(2)MUC1、LUNXmRNA表达阳性率随TNM分期的增高而增加，随细胞分化程度的升 高而降低 。 【关键词】 非小细胞肺癌；微转移；肿瘤标志物；mRNA 近几年非小细胞肺癌 (non—smallcelllungcancer， 1．2 方法 所有人组人员均空腹抽取外周静脉血 NSCLC)远处转移及局部复发是治疗失败的主要原 4mL，置于EDTA抗凝管，按 Trizol试剂盒说明溶解细 因…。研究证实，微转移的存在是易复发和转移的预 胞抽提总RNA，总RNA于紫外分光光度定量和 1．5％ 后指征 。设计 NSCLC微转移更加精细的检测方法 琼脂糖凝胶电泳分析鉴定其质量后，转入一80~C保存 可以进行分子生物学诊断和分期，对进一步评估患者 备用。 预后、指导在肿瘤可能转移的早期进行干预及肿瘤监 1．2．1 引物设计 如表 1所示。 控等方面具有重要意义 。。因此，本研究设计以敏感 表 1 引物设计 性较高的RT—PCR法 检测NSCLC患者外周血中组 mRNA 引物序列 产物长度 (bp) 织特异性基因或组织特异性蛋白mRNA的表达情况 ， 分析它们作为NSCLC微转移标志物与肿瘤类型、癌细 胞分化程度、临床分期的关系。 1 资料与方法 1．1 一般资料 自2007年9月至2009年9月在潍坊 医学院附属医院住院的 I～Ⅲ期 NSCLC患者47例 ， 均为未作过任何抗肿瘤治疗的新发初治病例，并筛除 其他肿瘤肺部转移。患者均经病理组织学(纤维支气 管镜活检、经皮肺穿刺活检、经皮淋巴结穿刺活检)确 诊NSCLC，其中鳞癌26例、腺癌21例。通过胸片、胸 部CT、骨同位素扫描、B超、头部 MR等或直接进行 PET—CT进行临床分期，参考2002年美国癌症分类委 1．2．2 RT—PCR方法 取 RNA4 加入到如下反 员会和国际抗癌联盟制定的TNM分期标准，其中I期 应体系中：Randomprimer2 L(500 g／mL)，5×反转 l5例，Ⅱ期 19例，Ⅲ期 l3例。 录Buffer4 L，2．5m