直接多肽结合试验组合人细胞系活化试验预测皮肤致敏物的探讨.pdfVIP

2016年 12月 中国实验动物学报 December2Ol6 第 24卷 第 6期 ACTA LABORATORIUM ANIMALISSCIENTIA SINICA Vo1．24 No．6 研究报告 ； 直接多肽结合试验组合人细胞系活化 试验预测皮肤致敏物 的探讨 柯逸晖 ，陈或 ，程树军 ，徐嘉婷 ，谈伟君h (1．广东药科大学，广州 510006；2．广东出入境检验检疫局技术中心，广州 510623； 3．广州市华代生物科技有限公司，广州 510535) 【摘要】 目的 建立直接多肽结合试验 (DPRA)和人细胞系活化试验 (h-CLAT)的皮肤致敏组合检测方法， 对化学品及植物提取物 的致敏性进行初筛 。方法 选择 12种化学 品和 7种植物提取物为受试物 ，把不 同受试物 分别与两种肽 (半胱氨酸肽和赖氨酸肽)共孵育24h，采用高效液相色谱法分析反应后多肽消耗。同时将不同浓度 的受试物与体外培养的人急性单核细胞白血病细胞(THP．1)共孵育24h，通过流式细胞仪检测暴露后细胞表面标 志物 CD86和 CD54的变化 。再进一步 比较 DPRA和 h-CLAT预测结果的一致性 。结果 DPRA方法和 h-CLAT方 法准确 区分 了 12种化学品的皮肤致敏性，其 中2种判定为阴性，10种判定为阳性 ，两种方法检测结果一致。DPRA 对植物提取物致敏性的预测 中，除绿茶提取物无法判定外，其余 6种均为皮肤致敏疑似物质。h-CLAT预测 中，除 绿茶提取物、马齿笕提取物和人参果提取物为非致敏物，其余 4种植物提取物为致敏物。DPRA与 h-CLAT预测的 一 致性为 0．57。结论 DPRA与 h-CLAT的简单组合可以实现对单一化合物 的准确预测 ，对于复杂混合物可实现 初步预测 ，确认需要进一步组合其他方法 。 【关键词】 直接多肽结合试验；人细胞系活化试验；皮肤致敏；替代方法 【中图分类号】Q95—33 【文献标识码】A 【文童编号2016)06—0611—07 Doi：10．3969／j．issn．1005—4847．2016．06．011 Preliminarystudyfor integratingDPRA withh·CLAT to predictskin sensitizers KEYi—hui ，CHENYu一，CHENGShu-jun ，XUJia—ting，TANWei-jun (1．GuangdongPharmaceuticalUniversity，Guangzhou510006，China；2．GuangdongInspectionandQuarantine TechnologyCenter，Guangzhou510623；3．GuangzhouChn—AltBiotech．Ltd．，Guangzhou510535) 【Abstract】 Objective ToestablishadetectionmethodintegratingDPRA(directpeptidereactivityassay)withh— CLAT (humancelllineactivationtest)toscreentheskinsensitizationpotencyofchemicalsa