授粉时期和套袋方式对烟草母本起源单倍体鉴定效率的影响-烟草科技.pdfVIP

2016 年 12 月 烟草科技 Dec. 2016 第49 卷第 12 期 Tobacco Science Technology Vol. 49 No. 12 授粉时期和套袋方式对烟草母本起源单倍体 鉴定效率的影响 * 曾建敏，焦芳婵，童治军，肖炳光，李永平，陈学军 云南省烟草农业科学研究院，中国烟草育种研究（南方）中心，昆明市圆通街33号 650021 摘要：以普通烟草（Nicotianatabacum）为母本，非洲烟草（N.africana）为父本进行远缘杂交，在子代中孤 雌应激可获得母本起源的单倍体。为解决实际应用中存在的单倍体诱导频率偏低、鉴别困难等问题, 采 用流式细胞术（Flow cytometry ，FCM ），鉴别了不同授粉时期、套袋方法条件下杂交子代中的单倍体。结 果表明，FCM 能够在苗期准确、快速鉴别母本起源的单倍体，排除二倍体、混倍体对试验的干扰。采用 纸管法套袋，非单倍体的烟苗存活率为0.24% ，而常规纸袋法套袋的非单倍体烟苗存活率为1.56% ，纸管 法非单倍体的烟苗存活率明显低于常规纸袋法，说明纸管法套袋可提高单倍体的鉴定效率。当母本花 冠长度与萼片长度差（SCD ）为2.5 cm 时，是进行非洲烟草杂交、预防混杂的适宜时期。因此，在SCD 为 2.5 cm 时进行授粉，用纸管法套袋，利用FCM 分析后代倍性，是获取母本起源单倍体的最佳方法。 关键词：普通烟草（Nicotianatabacum）；非洲烟草（N.africana）；流式细胞术；授粉时期；套袋方法 中图分类号：S572.032 文献标志码：A 文章编号：1002-0861 （2016 ）12-0008-05 Effects of pollination time and bagging means on identification of tobacco maternal haploids ZENG Jianmin ，JIAO Fangchan ，TONG Zhijun ，XIAO Bingguang ，LI Yongping ，CHEN Xuejun* Yunnan Academy of Tobacco Agricultural Sciences ，China Tobacco Breeding Research Southern Center ，Kunming 650021 ， China Abstract: Maternal haploid （MH ）was obtained by the interspecific hybridization method. In this system ， Nicotiana tabacum was hybridized as a female with Nicotiana africana due to parthenogenesis. In order to overcome the problems such as low induction rate of maternal haploid and difficult identification of maternal haploid from aneuploid interspecific hybrids in breeding practice ，flow cytometry （FCM ）was adopted to identify the maternal haploids of hybrid progenies produced by different bagging means at different pollination time. The results showed that maternal haploids were accurately and quickly identified by FCM at seedling stage and eliminated the disturbanc