螺旋藻C-藻蓝蛋白亚基分离及抗肿瘤活性研究.pdfVIP

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浙 江 大 学 学 报 (理学版 ) 第 37卷第 3期 JournalofZhejiangUniversity(ScienceEdition) http://www.journals.zjn.edu.cn/sci VMo1.37No.3 2010年 5月 ay2010 DOI:10.3785/j.issn.1008—9497.2010.03.016 螺旋藻 C一藻蓝蛋 白亚基分离及抗肿瘤活性研究 张 昕 ,郦剑勇,龚兴 国 (浙江大学 生命科学学 院,生物化学研究所 ,浙江 杭州 310058) 摘 要 :为解决 C藻蓝蛋 白分子较 大 ,难 以直接 与细胞 发 生作用 的 问题 ,对 藻蓝蛋 白亚基 的分 离纯化 方法进 行研 究 ,并初步探讨 了其 对肿瘤细胞 的抑制 作用.对通过 热变性 、盐析和 自制 的羟基磷 灰石 吸 附层析 ,从钝 顶螺旋 藻 中 获得 高纯度的藻蓝蛋 白(C—PC,A /A 。4.5).C—PC用 8mo卜I_。的尿素溶液变性 ,过 CM—SepharoseF.F.阳离 子交换层析 、透析 、复性 ,获得具活性 的C~PC亚基.用 CCK一8试 剂盒 分别研 究 了C—PC、d和 B亚基对 一个肺腺癌细 胞株 SPCA 1的生长的影响,结果表 明藻蓝蛋 白及其亚基对该细胞株 的生长具有抑制作用 ,0亚基效果最好 ,预示 着它们具有一定的抗肿瘤潜力. 关 键 词 :柱层析 ;复性 ;亚基 ;肺 腺癌细胞株 SPC—A一1;生长抑制作 用 中图分类号 :Q5l 文献标志码 :A 文章编号 :1008—9497(2010)03—3l9一O5 ZHANGXin,IdJian—yong,GONGXing—guo (InstituteofBiochemistry,CollegeoJ’lifeSciences,ZhejiangUni— versity ,Hangzhou310058,China) IsolationofC—PC subuni~ from spirulinaplatensisandinhibitoryeffectonSPC。A 1‘cellline.JournalofZhejiang University(ScienceEdition),2010,37(3):319—323 Abstract:Inorderto solve thedifficulty ofinteraction between C—phycocyanin(C—PC)and cells,themethodsof isolatingandpurifyingC PC subunitswereinvestigatedandtheantitumoreffectsofthem ontheSPC—A1cellswere studied also. A high efficiency and relatively convenientpurification system with tWO—step self—composed HA chromatogram wasdevisedintheresearch,andobtainedpureC—PCwithOD62。/OD280Of4.5.Afterdenaturingthe purifiedC—PC bysodium acetatebuffercontaining8 otol·L urea,thesubunitswereisolatedbycation exchange chromatographybyusingCM sepharoseF.F,thenthe

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