SLuCUT—A全自动激光显微切割系统植物染色体切割的研究.pdf

! !=塑 实 验 室 科 学 第 13卷 第2期 2010年4月 CN12—1352／N LAB0RAT0RY SCIENCE Vo1．13 No．2 Apr．2010 SLuCUT—A全 自动激光显微切割系统 植物染色体切割的研究 高居荣，韩秀兰，封德顺，李兴锋 (山东农业大学农学院 国家小麦改良中心泰安分中心，山东泰安 271018) 摘 要：SLuCUT—A全自动激光显微切割是目前比较先进高效的染色体微切割、微分离和微收集系统。为使 高精尖仪器设备在植物染色体遗传分析中广泛应用 ，此研究利用SLuCUT—A全 自动激光显微切割系统对普通 小麦 “中国春”和中间偃麦草染色体进行了微切割、微收集和微克隆，并且以回收到的切割染色体 (或染色 体片段)为模板进行了DOP—PCRDNA扩增。 关键词：单条染色体；微切割；微回收；微克隆技术；基因组DNA 中图分类号：Q781 文献标识码：A doi：10．3969／j．issn．1672-4305．2010．02．028 ApplicationsofSLuCUTfullyautomaticlasermicrodissection system onplantchromosomemicrodissection GAOJu-rong，HAN Xiu-lan，FENGDe—shun，LIXing-feng (ShandongTaianSubcentreofNationalWheatImprovementCentre，AgronomyCollege，Shandong AgriculturalUniversity，Taian271018，China) Abstract：SLuCUT—A fullyautomaticlasermicrodissectionsystem iSanadvancedandefficientsystem forplantchromosomemicrodissection，microcollection andmicrocloningatpresent．Inordertoapply thehigh-techequipmentintoplantgeneticanalysiswidely，SLuCUT-Afullyautomaticlasermicrodis— sectionsystem isusedtomicrodissectthechromosomeofbothcommonwheatChineseSpringandelytri— giaintermedium，thenmicrocollection andmicrocloningareperformed．Thedissectedchromosomeis usedastemplatetoperform DOP—PCR． Keywords：singlechromosome；microdissection；microcollection；microcloningtechnology；gDNA 染色体微切割、微克隆技术是由Scalenghe等… 进行染色体切割、分离和收集研究，但这三种仪器设 人于 1981年创立的一项分子细胞遗传学新技术。植 备操作复杂、技术难度大、污染较重、被分离的 目标染 物染色体显微切割技术就是在显微镜下，主要采用微 色体难以完全回收等。而SLuCUT—A全 自动激光显 细玻璃针或激光对特定的染色体或染色体片段进行 微切割系统切割植物染色体的应用研究在我国尚未 切割、分离，然后利用切割产物为模板进行外扩增， 见报道。SLuCUT—A全 自动激光显微切割系统的核 从而构建染色体或染色体区段特异性的DNA文库， 心技术是利用350纳米的紫外激光对显微镜下的生 其优点是可以根据研究者的需要，分离到任意一条染 物样本 (组织、细胞簇、单细胞、染色体、染色体片断 色体或染色体片段，并能快速地建立相