食品生物应用技术第五章-03节- 动物细胞工程、植物细胞工程及应用.ppt

动物细胞工程应用;动物细胞培养; 皮肤烧伤，如果创面很小（不大于硬币）只要保持清洁，甚至深度烧伤，也可能自愈。如果下层真皮受损面积较大，常常需要植皮。植皮需要的健康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自烧伤病人自身未烧伤的部位（自体植皮），也可取自其他活人或尸体（异体植皮）等。自体植皮是永久性的，取自其他人或动物的植皮是暂时性的，是在创面愈合过程中为保护创面而采取的措施，10～14天后就要被身体排斥。 ;人耳鼠;动物细胞培养和核移植技术;2、动物细胞培养的应用和概念：;动物细胞的培养过程;;3、动物细胞培养过程：;有关概念;有关概念;动物组织细胞培养要求;二 培养工具:;　根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异，用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀，便于细胞贴壁生长和观察，瓶口要大小一致，口径一般不小于1cm，允许吸管伸入瓶内任何部位。 　　  ;三、培养条件细胞在体外培养中所需的条件与体内细胞基本相同。;1）恒定的温度:37 ℃，;2）PH：7.2-7.４;3) 气体：;4）营养—培养基：;合成培养基;天然培养基;常用的动物血清主要有牛血清和马血清。牛血清分为胎牛血清和犊牛血清，前者来源少，价格高；后者要求刚产下尚未哺乳的小牛，因为哺乳后的小牛血清中可能含有更复杂的成分。血清中已知的成分主要有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等。蛋白质主要是白蛋白和球蛋白。;氨基酸是细胞合成蛋白质的基本成分，氨基酸中有12种是细胞本身不合成的，必须由培养液提供。激素有胰岛素、生长激素和多种生长因子如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、增殖刺激因子(MSA)、类胰岛素生长因子(IGFl、IGF2)等。 水解乳蛋白、胶原是另外两种较好的天然培养基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解产物，呈蛋黄色粉末状，富含氨基酸。一般配制成0．5％溶液，微酸性。胶原是从动物真皮中提取的，具改善细胞表面特性促使其附着生长的作用。;无血清培养基;5) 细胞培养溶液;抗生素溶液： 1)青、链霉素:每毫升培养液含100U青霉素和100ug链霉素. 2)卡那霉素：终浓度为50ug/ml培养液。 3）制霉菌素：浓度25U/ml，小瓶分装，每瓶一次用完。 ;6)、无污染环境;四 细胞培养设施;细胞培养实验室;培养室 ;风淋室： 　　 风淋室是生物洁净室的理想配套设备，它不仅可以清除人体和物品表面附着的尘埃，减少带入洁净室的灰尘量，而且兼有气闸室的功能，可防止非洁净空气的侵入。风淋室的板壁采用轻质隔热夹芯钢板，吹淋板采用进口不锈钢制作，吹淋口方向可调，风淋时间可在30-99秒间的调整。风淋室可以配合加热器，冬天可以加热，温度可调，一般控制温度在30-35℃较为适宜。; 超净工作台;CO2培养箱　;;冰箱;水纯化装置　　细胞培养对水的质量要求较高。一般需要使用重蒸或三蒸水配置各种培养用液。 ;过滤装置;细胞冷冻贮存器 　　细胞冷冻贮存具有经济、省力和较好保持细胞生物学特性的优点，目前各实验室主要使用液氮容器贮存细胞。;培养器皿　　　 培养器皿包括各种规格的玻璃、塑料培养瓶，培养皿，吸管，离心管等。;洗刷消毒间： 烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。 分析间： 显微镜、计算机及打印机等。　　;;无菌操作的要领;火焰消毒;合理布局　 右手使用方便的用品放右侧，左手使用方便的用品放左侧。　 　 酒精灯置于中央，打开的培养液、培养瓶等应保持斜立或平放（瓶口长时间开口直立,易增加落菌机会）。　 吸取各种用液应分别使用吸管，不能混用。 ;;3.动物细胞培养 的条件;4.动物细胞培养技术的应用;植物组织培养和动物细胞培养的比较;思考：;动物细胞融合与单克隆抗体;一、动物细胞融合;动物细胞融合;细胞A;用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程;细胞融合与融合诱导细胞融合物质;二、单克隆抗体;B淋巴细胞与抗体;单克隆抗体;如何大量生产单克隆抗体？; 单克隆抗体制备过程;思考：;单克隆抗体的应用;植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较;动物的胚胎移植;胚胎移植技术;一、动物体细胞核移植技术和克隆动物;核移植;3.培育过程;卵细胞;克隆羊的成功证明了什么？;动物体细胞核移植是一种无性繁殖技术，用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。;体细胞核移植技术存在的问题：; ; 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? ; 动物核移植：;卵细胞;2.体细胞核移植技术的应用前景;克隆动物的研究意义;小结;植物细胞工程 ;植物细胞工程的基本技术和理论基础 ;细胞的全能性;植物组织培养的概念;植物组织培养的过程;离体的植物器官、组织或细胞;;??关问题;植物体细胞杂交的概念;相