重庆市动物疫病免疫抗体监测.doc

附件 重庆市动物疫病免疫抗体监测 技术规范（试行） 1范围 本规范规定了动物疫病免疫抗体监测的病种、采血（采血器材、采血时间、采血方法、采血数量、全血保存、血清分离与保存）、检测方法、检测结果记录与汇总、血清留样等技术。 本规范适用于重庆市行政区域内动物疫病免疫抗体的监测活动。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本规范的引用而成为本规范的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本规范。然而，鼓励根据本规范达成协议的各方研究可以使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本规范。 引用标准有： 中华人民共和国动物防疫法； NY/T 541-2002，动物疫病实验室检验采样方法； NY/SY 150-2000，口蹄疫诊断技术规程； GB/T 18935-2003，口蹄疫诊断技术； GB/T 18936-2003，高致病性禽流感诊断技术； NY/SY 156-2000，猪瘟诊断技术规程； GB 16550-1996，新城疫检疫技术规范。 3监测病种 动物免疫抗体监测重点是重大动物疫病（口蹄疫、高致病性禽流感、猪瘟、新城疫）。 4 采血 4.1 采血器材 采样所需器材：防护服、无粉乳胶手套、防护口罩、灭菌剪刀、镊子、手术刀、注射器、针头、记号笔、签字笔、空白标签纸、胶布、抗凝剂、75%酒精棉球、碘酒棉球、15mL的离心管、1.5mLEP管、冰袋、冷藏容器、消毒药品、血清采样单和调查表等。 4.2采血时间：免疫注射后21天的动物方可采血。 4.3 采血方法 对采血部位的皮肤先剃（拔）毛，碘酊消毒， 75%的酒精消毒，待干燥后采血。采血方法推行生猪站立式或仰卧式前腔静脉、牛羊站立式颈静脉、禽类翅静脉采血，采血过程严格无菌操作。 4.4 采血数量 单一病种抗体监测的每头（只）采集2～3mL全血，多病种抗体检测的每头（只）采集5～10mL全血。 4.5 全血保存 采集好的全血转入盛血试管，斜面存放，室温凝固后直接放在盛有冰块的保温箱，送实验室。从全血采出到血清分出的时间不超过10h。 4.6 血清分离与保存 4.6.1 分离血清 凝固全血在室温2～4h后，有血清析出时，用无菌针剥离血凝块，然后放入4℃冰箱4～8h后，待大量血清析出时，吸出血清。必要时经离心机3000rpm 、30min离心，吸出血清。 4.6.2 血清保存及运送 分离的血清，一般不加防腐剂。血清若在1～2周内即可检验，可放在4℃冰箱内保存；如果保存时间较长，应放在-20℃～-80℃冰箱内保存。运送血清时可将血清放在盛有冰块的保温箱中运送。 4.6.3血清编号及采样单填写 采血时应按《动物血清采样单》的内容详细填写采样单，动物血清采样单一式三份，一份由被采样单位保存，一份由送检单位保存，一份由检测单位保存。动物血清采样单详见附表1。 5抗体检测方法 常见动物疫病免疫抗体检测标准及方法详见附表2。 6检测结果记录与汇总 6.1 抗体效价记录 每份血清检测完毕，分滴度（效价）进行记录。抗体结果记录表详见附表3。 6.2 抗体检测结果汇总 以监测区县、乡镇、规模畜禽场、行政村为单位，分单位、时间、动物病种、动物种类、动物年（月）龄等分滴度进行汇总。抗体结果汇总表详见附表4。 7血清留样 血清监测完以后，需要对血清进行编号留存，填写血清留样记录表。血清留样记录表详见附表5。 8 附表 1、动物血清采样单； 2、常见动物疫病免疫抗体检测标准及方法； 3、抗体结果记录表； 4、抗体结果汇总表； 5、血清留样记录表。 表1 动物血清采样单 血清样品编号 动物种类 种（蛋）用 日龄 耳标号 免疫情况 健康状况 采样地点 抽样比例 市场样品来源地 备注 疫苗种类 生产厂家/批号 免疫剂量 免疫时间 （乡镇、村、养殖场、屠宰场、市场、畜主） 被采样单位: 采样时间 采样人（签字）： 采样单位: 表2 常见动物疫病免疫抗体检测标准及方法 分类 动物疫病种类 执行标准 检测方法 国家强制免疫的重大动物疫病 禽流感 GB/T 18936-2003 血凝-血凝抑制试验（HA-HI）和琼