催化动力学光度法研究氧化乐果对碱性磷酸酶的抑制作用.pdfVIP

第28卷第5期 平顶山学院学报 Vo1．28No．5 2013年 1O月 JournalofPingdingshanUniversity Oet．2013 催化动力学光度法研究氧化乐果 对碱性磷酸酶的抑制作用 冯春梁，王 璐，孙 越，柏雨辰，杜 朋 (辽宁师范大学 化学化工学院 功能材料化学研究所，辽宁 大连 116029) 摘 要：基于有机磷农药对碱性磷酸酶活性的抑制作用，以碱性磷酸酶(ALP)催化3一吲哚酚磷酸酯 (3一IP)生成靛蓝为研究体系，利用催化动力学光度法研究了氧化ft．果对ALP的抑制作用．结果表明，在pH8．O 蹦s—HC1溶液中，靛蓝的最大吸收波长为683nm，AIJP的最佳浓度为O．15U／mL，3一IP的最佳浓度为3×10I3 mol／L，氧化乐果对ALP的抑制时间为20min．该研究为建立快速检测农药残留的催化动力学光度法奠定 了基 础，对构建有机磷农药抑制型生物传感器具有重要应用价值． 关 键 词：有机磷农药；碱性磷酸酶；催化动力学光度法；抑制作用 中图分类号：0657．1 文献标识码：A 文章编号：1673—1670(2013)05—0057—04 农药作为现代农业生产中必不可少的一种生 制型生物传感器方面已开展了大量研究工作 ]， 产资料，对增产增收具有重要作用．然而，农药主要 但是乙酰胆碱酯酶价格昂贵，限制了酶抑制型生物 是一些有毒有害的有机物，长期大量使用，不仅对 传感器 的商 品化过程．相对而言，碱性磷酸酶 土壤、地表水、地下水和农产品造成污染，而且还会 (ALP)价格便宜，有机磷农药对ALP具有显著的 进人生物链，对环境生物安全和人类健康都将产生 抑制作用 ¨．利用有机磷农药对碱性磷酸酶活性 巨大危害 ¨I2．由于农药的过量使用和滥用，所造 的抑制作用可以设计制作一类新型生物传感器．笔 成的中毒事件时有报道，食品中农药残留量超标也 者以ALP催化3一吲哚酰磷酸酯(3一IP)生成靛蓝 是导致癌症患病率不断上升的重要因素之一L3J． 为研究体系，提出了一种催化动力学光度法研究氧 这些问题的长期存在，一是农民缺乏科学知识，缺 化乐果对 ALP抑制作用的新手段．在pH8．0酸度 少环保意识，少数农民不顾消费者的身体健康和生 条件下，主要对靛蓝的最大吸收波长、ALP的最佳 命安全，过量施用农药化肥，只顾追求经济效益．二 浓度、3一IP的最佳浓度进行了选择．结果表明，在 是 目前还缺少一种有效地快速检测农药残留量的 pH8．0Tris—HC1溶液中，在 AIJP的含量为0．15 实用技术，致使政府职能部门缺少有力的监管手 U／mL、3一IP浓度为3×10 mol／L的优化条件 段．传统检测有机磷农残的方法，如气相色谱／质谱 下，氧化乐果对 ALP抑制时间为20min．所得到的 联用法 (GC／MS) 和高效液相色谱法 (HPLC) 研究结果不仅为建立检测农药残留的催化动力学 尽管能比较准确地检测农药的残留量-4J，但是设 光度法奠定了基础，也为优化研制碱性磷酸酶抑制 备昂贵，样品前处理方法繁琐、分析周期长，难以满 型生物传感器的实验条件提供了一种简便可靠的 足快速检测的需要．农药残留的快速灵敏检测是环 新方法． 境保护、食品安全领域亟待解决的关键问题． 1 实验部分 近年来，越来越多的科研工作者致力于开发快 速、灵敏、简便、可用于现场监测的有机磷农药传 1．1 仪器与试剂 感器 』．人们在利用有机磷农药对乙酰胆碱