50例患者静脉血RBC中检出一种Gram(+)真菌.docVIP

50例患者静脉血RBC中检出一种Gram(+)真菌 　　【摘 要】目的：检测各类贫血病患者静脉血RBC中感染的真菌种类和区别，寻求敏感药物治疗，减少临床用血量，节约血资源。方法：白血病患者静脉血50-100μl滴加在1640和生理盐水混合液中培养，22-36度条件下，置100×显微镜下观察接种后至120小时的真菌和原虫生长感染红细胞状况。结果：不同类型贫血病患者静脉血培养中镜下均可见同一种真菌生长。镜下观察：伴随温度的提高，①真菌在红细胞内繁殖速度加快，二分裂倍数增长，最后呈喷射状释放到红细胞体外，呈球形游离单体，运动速度极快，致使血红蛋白流失，形成影形红细胞，导致患者贫血。温度低时，即结成杆状菊花状。同时可见血小板被①真菌侵袭后运动速度加快，形成影形印戒形，被白细胞吞噬。结论：贫血患者静脉血中见到同一类真菌可为正常人类红细胞中感染的一种真菌，当伴有其他原虫和真菌类病原微生物侵袭时诱发繁殖速度加快，RBC中HB流失加快，导致各类贫血病。 【关键词】RBC；真菌；贫血病 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）06-0028-02 目前人类关于贫血病因的研究，检测项目很多，国际上，我国、日本、美国、加拿大等国家一直在寻求诊断、治疗的新手段和途经。而我们在各类贫血患者静脉血RBC中检出Gram（+），可被复红，美兰单染的真菌。 1材料与方法 1.1 材料 1.1.1 2008年3---9月，2011年2--7月血液病患者和待产患者血常规无菌静脉血2毫升！ 1.1.2 1640 dspx /生理盐水（1640 dspx：1640+pha+小牛血清+庆大霉素）。 1.1.3 80-100公分无菌细菌培养皿和细胞培养瓶。 1.1.4 显微镜工作站一台。 1.2 方法： 1.2.1无菌手段采取患者静脉血2毫升 1.2.2无菌方法注入患者全血2―4滴和血浆0.5毫升于含有（dspx1640 2毫升）和无菌生理盐水10---15毫升培养液的无菌细胞培养瓶/细菌培养皿中，培养1----306小时。 1.2.3置显微镜下（40倍/100倍）?检：借助电脑工作站放大观察：活体细胞和菌类生存状态。可在接种后立即观察，连续观察，间歇观察。（ 1640 dspx ： 1640+pha+小牛血清+庆大霉素）。 1.3 染色： 1.3.1将美兰2滴滴加到 无菌细胞培养瓶中或细菌培养皿中的一端15―20分钟。置显微镜下?检：（40倍/100倍）借助电脑工作站放大观察：活体细胞和菌类生存状态。 1.3.2 将（Gram染液）结晶紫1-2滴滴加到无菌细胞培养瓶中或细菌培养皿中的另一端5―8分钟。?检 1.3.3 将（Gram染液）碘液1-2滴滴加到 无菌细胞培养瓶中或细菌培养皿中的中端5---6分钟。?检： 1.3.4将（Gram染液）95%酒精液5-8滴滴加到 无菌细胞养瓶中或细菌培养皿中结晶紫染色端10---14分钟。?检 1.3.5将（gram染液）复红液2-3滴滴加到 无菌细胞培养瓶中或细菌培养皿中5---8分钟。?检 1.3.6将染色后的培养液混合均匀，?检.。 2 显微镜下观察： 结果：我们在各类贫血患者静脉血RBC中检出Gram（+），可被复红，美兰单染的真菌。该菌呈球形，颗粒状。有绿色银光，菌体饱满较大，单体或多体，多体呈不规则窜珠状，被WBC吞噬，有动力，单体运动速度快。可侵袭血小板，RBC，并在胞体内增殖，对数增张，繁殖的速度极快，随着RBC体内菌体数量的增多，RBC和菌体的体积缩小，并随着培养液温度的提高，菌体的繁殖速度加快，菌体由念珠菌大小转化为链球菌单个颗粒大小，突出RBC膜后，（1）RBC起脊，呈畸形，以喷吐方式单个排除。（2）RBC的一端隆起，菌体呈不规则窜珠状，排到培养液之中。导致RBC之中Hb流失，形成空泡型内含菌体颗粒的RBC。该菌为对数增殖的粒性菌体，30～34.度C生长活跃，26～29度C 24--48小时可见有菌丝形成。 3 结论： 贫血患者静脉血中见到一类可感染人类红细胞的真菌，当伴有其他原虫和真菌类病原微生物侵袭时诱发繁殖速度加快，侵袭RBC中HB流失加快，导致各类贫血病。 4 讨论： 4.1 在50例患者血常规静脉血培养镜下观察、分析：我们感到人体血液之中存在一种，可导致TC和RBC裂解，丧失功能的菌！但WBC这一人体的卫士不断清除TC和RBC、和血液之中单个的该菌，促进人体的新陈代谢，维系着人体的动态平衡！当有其它微生物入血，打破平衡，该菌繁殖速度快，冲破了WBC清理的极限，在其它微生物伴有生长的同时，急速大量的生长，