大肠杆菌中重组多肽栽葬贼鄄孕云运酝灾灾的分离尧表达和.PDFVIP

南京医科大学学报 自然科学版冤 第猿猿 卷第缘 期 缘怨愿 ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJI NG Natural Science 冤 20员猿 年缘 月 大肠杆菌中重组多肽 葬贼鄄孕云运酝灾灾 的分离尧表达和纯化 爽 宇 朱东亚鄢 南京医科大学药学院药理教研室袁江苏 南京 圆员园园圆怨冤 摘 要暂 目的院构建重组表达载体责耘阅鄄栽葬贼鄄孕云运酝灾灾袁在大肠杆菌中表达并通过纯化以获得重组多肽栽葬贼鄄孕云运酝灾灾遥 方法院 用孕悦砸 的方法扩增出栽葬贼鄄孕云运酝灾灾 基因袁插入含栽苑 启动子的责耘阅 表达载体袁构建重组表达载体 责耘阅鄄栽葬贼鄄孕云运酝灾灾袁重组表达 载体转化至大肠杆菌并表达袁表达产物经洗涤尧乙醇沉淀袁酸水解和等电点沉淀纯化目的多肽遥 结果院克隆的栽葬贼鄄孕云运酝灾灾 基因 与郧藻灶遭葬灶噪 对比袁二者同源性为 员园园豫袁酸水解位点正确遥 大肠杆菌表达的融合蛋白产物粤灶泽月鄄悦鄄栽葬贼鄄孕云运酝灾灾 经杂阅杂鄄孕粤郧耘 电 泳显示相对分子量为 员苑 园园园袁质谱显示最终纯化产物栽葬贼鄄孕云运酝灾灾 蛋白相对分子量为圆 远缘怨遥 通过郧杂栽鄄责怎造造 凿燥憎灶 实验证明栽葬贼鄄 孕云运酝灾灾 蛋白能在体外解开神经元型一氧化氮合酶与肌肉型磷酸果糖激酶的偶联遥 结论院 成功构建了表达粤灶泽月鄄悦鄄栽葬贼鄄 孕云运酝灾灾 融合蛋白的原核表达体系袁纯化得到了较高纯度的目的多肽栽葬贼鄄孕云运酝灾灾遥 通过此过程建立了一套简单可行且高效的 融合蛋白表达尧水解尧分离与纯化的方法遥 关键词暂 栽葬贼鄄孕云运酝灾灾曰基因表达曰蛋白纯化 中图分类号暂 匝苑愿远 文献标志码暂 A 文章编号暂 员园园苑鄄源猿远愿 圆园员猿冤园缘鄄缘怨愿鄄园远 凿燥蚤院员园援苑远缘缘辕 晕再阅载月晕杂圆园员猿园缘园苑 悦造燥灶蚤灶早袁藻曾责则藻泽泽蚤燥灶葬灶凿 责怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶燥枣 葬 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 栽葬贼鄄孕云运酝灾灾 责藻责贼蚤凿藻 蚤灶 泽糟澡藻则蚤糟澡蚤葬糟燥造蚤 在澡葬灶早 杂澡怎葬灶早袁在澡葬灶早 再怎袁在澡怎 阅燥灶早赠葬鄢 藻责葬则贼皂藻灶贼 燥枣 孕澡葬则皂葬糟燥造燥早赠袁孕澡葬则皂葬糟赠 悦燥造造藻早藻 燥枣 晕允酝哉袁晕葬灶躁 蚤灶早 圆员园园圆怨袁悦澡蚤灶葬冤 咱Abstract暂 Obj ective 院宰藻 泽燥怎早澡贼 贼燥 糟燥灶泽贼则怎糟贼 贼澡藻 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 增藻糟贼燥则 责耘阅鄄栽葬贼鄄孕云运酝灾灾 贼燥 藻曾责则藻泽泽 葬灶凿 责怎则蚤枣赠 贼澡藻 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻 栽葬贼鄄孕云运酝灾灾援 Methods 院 栽澡藻 早藻灶藻 枣则葬早皂藻灶贼 藻灶糟燥凿蚤灶早 葬 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻 栽葬贼鄄孕云运酝灾灾 憎葬泽 糟燥灶泽贼则怎糟贼藻凿 遭赠 孕悦砸 葬灶凿 造蚤早葬贼藻凿 蚤灶贼燥 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 增藻糟贼燥则 枣燥则 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 蚤灶 葬 栽苑 砸晕粤 责燥造赠皂藻则葬泽藻鄄遭葬泽藻凿 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 泽赠泽贼藻皂援 栽澡藻 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 责造葬泽皂蚤凿 增藻糟贼燥则 憎葬泽 贼则葬灶泽凿怎糟藻凿 蚤灶贼燥 耘援糟燥造蚤援 栽澡藻 藻曾责则藻泽泽藻凿 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻 憎葬泽 责葬则贼蚤葬造造赠 责怎则蚤枣蚤藻凿 遭赠 贼澡藻 憎葬泽澡 泽燥造怎贼蚤燥灶 燥枣 栽则蚤泽鄄悦造辕 栽则蚤贼燥灶载鄄员园园袁葬造糟燥澡燥造 责则藻糟蚤责蚤贼葬贼蚤燥灶袁葬糟蚤凿 澡赠凿则燥造赠泽蚤泽 葬灶凿 蚤泽燥藻造藻糟贼则蚤糟 责燥蚤灶贼 责则藻糟蚤责蚤贼葬贼蚤燥灶援 Results 院栽澡藻 糟燥则则藻糟贼 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 阅晕粤 糟燥凿蚤灶早 枣则葬早皂藻灶贼 憎葬泽 增葬造蚤凿葬贼藻凿 遭赠 阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早援 栽澡藻 员苑 园园园 粤泽灶月鄄悦鄄栽葬贼鄄孕云运酝灾灾 枣怎泽蚤燥灶 责则燥贼藻蚤灶 憎葬泽 澡蚤早澡造赠 藻曾责则藻泽泽藻凿 蚤灶 耘援糟燥造蚤 月蕴圆员 贼则葬灶泽凿怎糟藻凿 遭赠 责耘阅鄄栽葬贼鄄孕云运酝灾灾援 栽澡藻 葬灶葬造赠泽蚤泽