细胞分子生物学（扬州大学）第十六章 遗传密码与蛋白质的合成.pptVIP

第十六章遗传密码与蛋白质合成 第一节遗传密码子与tRNA 一、遗传密码的本质 定义：三个连续的核苷酸组成编码一个氨基酸的遗传密码子（codon），代表核酸的四种碱基序列与蛋白质的20种氨基酸序列之间的对应关系 遗传密码的简并性：4个碱基可随机组合成64个不同的密码子（其中3个为终止密码子），而蛋白质只有20种氨基酸，所以多数氨基酸由1种以上三联码编码 反密码子（anticodon）: tRNA分子一端识别mRNA上三联码的互补密码子 密码子的通用性：在所有生物中，遗传密码子几乎是通用的，表明所有生命具有共同的进化起源 二、遗传密码的特点 在20种氨基酸中，仅蛋氨酸和色氨酸由单一密码子编码，而18种氨基酸由一种以上密码子编码，这些简并密码子称为同义密码子 在遗传密码表中，同义密码的位置不是随机的，而是按组排列的，其差异主要限于第三位碱基 在所有情况下，如果第三位是嘧啶，相应密码子编码相同（即同义）的氨基酸 在多数情况下，如果第三位是嘌呤，密码子也是同义的 在一般情况下，如果第二位是嘧啶，该密码子则编码亲水性氨基酸 如果第二位是嘌呤，该密码子则编码极性氨基酸 四、tRNA的结构与功能 功能：特定氨基酸的搬运分子 一级结构：60-95个（通常为76个）核苷酸，许多碱基发生化学修饰（有时占总碱基的20%） 二级结构：三叶草结构 三级结构：由9个氢键形成tRNA分子的三级结构， D臂和T臂上的碱基配对将tRNA分子折叠成L形，反密码子环在L形结构的一端，而氨基酸接受臂在另一端 第二节蛋白质的合成 一、氨基酸的活化转运 在氨酰tRNA合成酶(aminoacyl tRNA synthetase)作用下，tRNA通过氨酰化反应与特异氨基酸结合 活化：aa + ATP + E* →氨基酰-AMP-E + PPi 转移：氨基酰-AMP-E + tRNA →aa - tRNA+AMP +E 对于一种氨基酸而言，尽管可能有多种tRNA和多种反密码子，但通常只有一种氨酰tRNA合成酶 合成酶对合适tRNA的识别不仅仅是反密码子，受体臂也起显著作用 二、蛋白质的合成过程 以原核生物的蛋白质合成为例，人为地分为起始、肽链延长和终止三个阶段 肽链合成的起始 肽链的延长 肽链合成的终止 （一）肽链合成的起始 肽链合成起始阶段的必需组分： mRNA N-甲酰甲硫氨酰-tRNA (fMet-tRNAfMet) mRNA上的起始密码子(AUG) 30S核糖体小亚基 50S核糖体大亚基 GTP，Mg2+ 起始因子(IF-1, IF-2, IF-3) （二）起始因子 (initiation factor, IF) 参与蛋白质起始复合物的形成 IF-1：促进IF-2和IF-3的活化 IF-2：促进fmet-tRNAfmet与30S小亚基结合的作用，并有依赖核糖体的GTP酶活 IF-3：使30S亚基释放，辅助mRNA与小亚基结合，并阻止大小亚基重新聚合 （三）起始复合物的形成 （四）肽链延长 必需组分：功能核糖体（起始复合物），aa-tRNA，延长因子，GTP，Mg2+， 肽基转移酶 延长因子 （EF） EF-Tu：与氨酰-tRNA及GTP结合形成EF-Tu –GTP-aa-tRNA，将氨酰tRNA转入A位，但不能识别fmet-tRNA EF-Ts：在GTP供能时，使EF-Tu-GDP转变为EF-Tu-GTP EF-G：依赖于核糖体的GTPase，使GTP水解，并有移位酶作用 具体过程： ① 进位（新的氨基酸tRNA进入“A位”） ② 转肽（形成新的肽键） ③ 脱落（转肽后“P位”上的tRNA脱落） ④ 移位（核蛋白体挪动的同时，原处于“A位”带有肽链的tRNA随之转到“P位”） （五）肽链合成的终止 必需组分： ATP，mRNA上的终止密码子，释放因子(RF-1, RF-2, RF-3) 终止因子 (termination factor, TF)，又称释放因子(release factor, RF)，功能是识别mRNA上的终止密码子, 终止肽链的合成并释放出肽链 RF-1:识别密码子UAA及UAG RF-2:UAA及UGA RF-3:结合GTP,并促进RF-1及RF-2与核糖体的结合 三、真核与原核生物蛋白质合成的异同 真核生物的核蛋白体（80S）大于原核生物，小亚基为 40S，含有一种 (18S) rRNA；大亚基为60S，含有 3种rRNA（28S rRNA、5.5S rRNA 和 5S rRNA），所含的核蛋白体蛋白质亦多于原核生物 原核生物小亚基16S rRNA的3’-端有一富含嘧啶的区段，可与其mRNA启动部位富含嘌呤的SD区互补结合，而真核生物相应的r