本科生质谱实验.pptVIP

有机化合物准确分子量的测定 * 质谱发展史 1898 Wien 发现带正电荷的离子束在磁场中发生偏转。 1910 Thompson 使用简单的电场-磁场组合装置, 获得了抛 物线族的质谱, 证明了20Ne,22Ne两种同位 素的存在。 1918 Dempster 采用电子轰击技术使分子离子化。 1919 Aston 制得了第一台速度聚焦质谱仪。提出每种同 位素的质子和中子在结合成原子核时, 具 有特定的质量亏损(并非整数值)。 50年代后 商品MS出现, 用于石油精炼和橡胶工业。 概 述 质谱分析法：将试样转化为运动的样品离子，利用不同离子在电场或磁场运动行为的差异，按其质荷比大小进行分离、检测记录的一种仪器分析方法。 质谱图：化合物分子通过一定方式裂解后生成的 阳离子经电场和磁场的综合作用，按照样品分子电离所产生碎片离子的质荷比及其强度作图，并按质荷比（m/z）大小有序排列的谱。 用途：测定相对分子量M；确定分子式；定量分析；推测结构；气－质联用、液－质联用等。 质谱仪 质谱仪的基本组成 高真空系统 离子源（10-3?10 -5 Pa ）； 质量分析器（10 -6 Pa ） 质谱仪的工作流程①通过合适的进样装置将样品引入并进行气化 ②气化后的样品引入到离子源进行电离 ③电离后的离子经过适当的加速后进入质量分析器④离子在磁场或电场的作用下，按不同的 M/Z 进行分离 ⑤对不同 M/Z 的离子流进行检测、放大、记录(数据处理)⑥得到质谱图进行分析 高真空的原因 (1)大量氧会烧坏离子源的灯丝； (2)用作加速离子的几千伏高压会引起放电； (3)引起额外的离子－分子反应，改变裂解模 式，谱图复杂化。 质谱仪的主要部件及工作原理 1、真空系统 2、进样系统 进样系统类型 原理 适用对象 加热进样 将试样先气化然后进入高真空的离子源 气体、沸点低（小于500℃）且易挥发的液体、中等蒸汽压固体试样 直接进样 通过切换阀建立一个临时真空进样通道，进样杆将试样引入离子源 高沸点的液体及固体试样 （可获得热不稳定化合物质谱图） 色谱进样 将色谱分离后的流出组分通过适当接口引入质谱系统 有机试样 * 3、离子源 功能：将进样系统引入的气态样品分子转化成离子。 分子失去电子，生成带正电荷的分子离子 ，分子离子可进一步裂解，生成质量更小的碎片离子。 分类： 1.软电离(如 ESI)：给样品较小能量的电离方法，适用于易破碎或易电离的样品。分子离子峰强度大，碎片离子峰少且强度低，质谱图比较简单，M易得。 2.硬电离(如 EI)：给样品较大能量的电离方法。能使分析物处于高能量激发态，弛豫过程有 键 的断裂，产生碎片得到官能团信息。 离子阱质量分析器 离子阱质量分析器（Ion Trap Analyzer）是一种通过电场或磁场将气相离子控制并储存一段时间的装置。 特点:结构小巧，质量轻，灵敏度高同时易于实现多级质谱功能。 变化的射频电压 陷入阱中的离子轨道会发生变化，从 底端离开环电极腔而进入检测器 小孔 * 4.2四极杆质量分析器 ?四极质谱结构简单，价廉，体积小，易操作，无磁滞现象，扫描速度快，适合于GC-MS, LC-MS。分辩率不高。 + Electron Beam A B C Sample in Ion Beam 当离子由电极间轴线方向进入电场后，会在极性相反的电极间产生振荡。只有质荷比在一定范围的离子，才可以围绕电极间轴线作有限振幅的稳定震荡运动，并到达接收器。只要有规律地改变所加电压或频率，就可使不同质荷比的离子依次到达检测器，实现分离的目的。 直流电压 射频交流电压 4.4 飞行时间质谱计 TOF MS的核心部分是一个无场的离子漂移管 。 加速后的离子具有相同的动能 m/z小的离子，漂移运动的速度快，最先通过漂移管， 到达检测器。 m/z大的离子，漂移运动的速度慢，最后通过漂移管， 到达检测器。 检测通过漂移管的时间( t )及其相应的信号强度，可得 到质谱图，t为? 或s数量级。 适合于生物大分子，灵敏度高，扫描速度快，结构简 单，分辨率随m/z的增大而降低。 实验仪器与试剂 仪器：美国AB公司（Applied Biosystems） API 2000质谱仪 试剂：罗丹明B (Rhodamine B, Aladdin Chemistry)