方法与试验设计.pptVIP

* * 尾部取血(tail Clip)： 適用於採取小量血液樣本，而不犧牲動物，以大鼠為例。 心臟取血(intracardiac puncture)： 心內穿刺採血適用於採取大量血液樣本，而犧牲動物。 採血法 * 小鼠尾靜脈注射 * 大鼠尾靜脈注射 * * * * 方法與試驗設計 * 試驗物質 功效探討 1. In vitro cell model 2. In vivo animal model * Animal experiment 疾病研究 動物科學研究 抗體生產 藥物研究 保健食品研究 * 動物實驗設計 動物實驗設計 動物預養 動物訂購 動物分組 正式動物試驗 (餵食試驗物質) 模式動物建立 (給藥、手術等) 行為觀察、採血 犧牲、採臟器、血液 分析、病理檢測 * 組別 目的 正常組 正常動物 控制組 未治療之疾病動物 正控制組 以藥物治療之疾病動物 低劑量試驗組 低試驗物質劑量組處理之疾病動物 中劑量試驗組 中試驗物質劑量組處理之疾病動物 高劑量試驗組 高試驗物質劑量組處理之疾病動物 實驗動物分組設計 * 每組動物隻數至少大於六隻，才具有統計意義。 實驗動物隻數 實驗動物隻數刪減 試驗數量=12 隻大鼠 採用數據之數量= 8 隻大鼠 * 動物訂購 國家實驗動物中心 樂斯科生物科技股份有限公司 進階生物科技公司 (基因轉殖動物進口) 慈濟大學實驗動物中心 成大實驗動物中心 台大實驗動物中心 台東種畜繁殖場 * 動物模式之種類 實驗或誘發模式 (Induced or experimental models) 自發模式 (Spontaneous or natural models) 負模式 (Negative or non reactive models)： 孤兒模式(Orphan models)： 所研究之疾病以實驗誘導方式在動物身上表現 疾病自然發生，非由研究者所誘導。例如裸鼠 疾病自然存在於某動物，但卻在人類身上找不出可對照、類似的疾病，之後才在人類身上找出類似的疾病。例如狂牛病 動物對某特殊刺激不具反應能力，常用於對疾病抵抗機制之研究 * 選擇適合的動物品種需考慮以下幾種幾項因素　(a) 針對動物因素之考量　　(1)來源：來源是否亦取得　　(2)壽命：如壽命過長，研究所需時間亦會加長　　(3)飼養需求及條件　　(4)人員操作之方便性：如容易抓取　　(5)環境之適應力　　(6)微生物之了解與控制　　(7)遺傳資訊之了解　　(8)品系之多元化：有近親品系、雜交系、遠親交配種等　　(9)繁殖性狀：是否容易繁殖，胎兒仔數如何　　(10)價格　　(11)生物學特徵之了解：如生理、生化、解剖及組織等之資訊　　(12)人道及道德考量　(b) 針對疾病因素之考量　　要考量動物之疾病與人類疾病是否有極高的忠實性 (fidelity)，譬如臨床症狀、遺傳、病因、病程、病理等之相似性。 * 常見人類疾病之動物模式 　 高血壓　 癌症　 腎臟炎、關節炎　 糖尿病　 病毒性肝炎　 心肌症　 心肌缺血、動脈粥樣硬化　 安全性試驗 * 臨床症狀：皆產生高血壓，且雄性高於雌性 遺傳：皆為多基因(polygene)之控制? 病因：皆非心臟血輸出量增加，而是心血管之阻力增加。 病程：生下時無病症，而隨年齡之增加而明顯。 病理：皆會出現左心室肥大之併發症。 * 化學物致癌：如使用焦油 (Tar)會造成兔子及小鼠皮膚癌，DMBA (7,12dimethylbenz(a)anthracene) 亦為常用之化學致癌物。? 病毒致癌：如 Epstein-Barr 可能與 Burkitt’s 淋巴腺癌有關，papilloma 病毒與子宮頸癌有關。 自發腫瘤：一些近親品系動物會自然產生癌症，比如 AKR 會自然產生白血症。可做為人類白血病之研究。C3H小鼠也易產生乳房癌。 NOD-SCID 易生胸腺淋巴瘤。 致癌基因 (oncogene)：致癌基因能促成癌症的產生，如 avian sarcoma virus， 而一些anti-oncogene 及 tumor suppressor gene，如Rb (retinoblastoma gene) 及 p53 gene 一但發生突變或被基因替剔除，則會促成癌症之形成。 * 第一型為 insulin dependent diabetes mellitus (IDDM)，主要是胰臟分泌胰島素的細胞受到破壞而致，通常為自體免疫所造成。 Non-obese diabetic (NOD) mouse? 自發模式 BB rat 誘發模式：可用藥物或手術誘發 藥物注射　－ Streptozotocin (SZ) 及 alloxane 為最常用的藥物　－ S