高中生物复习提纲人教版选修三记忆要点.docVIP

高三生物复习提纲 选修三 基因工程识记要点 1、限制酶主要是从 原核 生物中分离纯化，其作用部位是双链DNA每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的 磷酸二酯 键；解旋酶的作用部位为 氢 键；DNA连接酶的作用部位为 磷酸二酯 键；DNA聚合酶的作用部位为 磷酸二酯 键；上述四种酶中 DNA聚合酶 作用于单链。 2、经限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形式 黏性末端 和 平末端 。EcoRI酶切割后产生黏性末端，其识别序列为 GAATTC 。E·coli DNA连接酶可以连接 黏性 末端，T4DNA连接酶可以连接 黏性末端和平 末端。 3、载体必须具备哪些基本条件？①能 在宿主细胞内稳定保存并大量复制 ；②有一至多个 限制酶切割位点 ，供 外源基因 (或外源DNA片段) 插入其中；③有特殊的 遗传标记基因 ，供 重组DNA的鉴定和选择 。 4、基因工程中使用的载体为 质粒 、 入噬菌体的衍生物 和 动植物病毒 等。 5、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 目的基因的获取 、 基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞 、 目的基因的检测与鉴定 ，其中，第 2 步为基因工程的核心步骤。 6、目前常用的获取目的基因的方法为：① 从基因父库中获取目的基因 ；② 利用PCR技术扩增目的基因 ；③如果基因比较 小 ，核苷酸序列 已知 ，也可以用 化学合成 法。 7、基因文库分为两类 基因组文库 和 部分基因文库 。cDNA如何获得？通过 反转录(或逆转录)方法获得。 8、(1)PCR的全称为 聚合酶链式反应 ，原理为 DNA双链复制 ，利用PCR技术获取目的基因的前提是：要有一段 已知目的基因的核苷酸 序列，以便根据这一序列合成 引物 。 (2)PCR中需要一种特殊的 热稳定DNA聚合(或耐热的DNA聚合酶或Taq酶) 酶。 (3)PCR分为哪三步，分别是什么温度？① 变性 ，温度 900-950C(940C) ；② 复性 ，温度55-600C(550C) ；③ 延伸 ，温度 70-750C(720C) 。 9、构建基因表达载体的目的是 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用 ，一个基因表达载体的组成必须包括 目的基因 、 启动子 、 终止子 和 标记基因 等。 10、标记基因的作用是 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来 。 11、将目的基因导入植物细胞最常采用的方法是 农杆菌转化法 ，在此方法中，目的基因应插入到 Ti质粒的T-DNA 上。单子叶植物常用的基因转化方法为 基因枪法 ，我国科学家独创的、将目的基因导入植物细胞的方法是 花粉管通道法 。 12、将目的基因导入动物细胞最常用、最有效的方法是 显微注射技术 。该方法的基本操作程序是：首先将含有目的基因的表达载体 提纯 ；最终要将注射了目的基因的 受精卵 经 胚胎的早期培养 后，再移植到雌性动物的 输卵管或子宫 内，使其发育成为具有新性状的动物。 13、早期的基因工程操作为什么都用原核生物作受体细胞？因为原核生物 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 。大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用 Ca2+ 处理细胞，使细胞成为 感受态细胞 。第二步是在一定的温度下将重组表达载体与上述细胞溶于 缓冲液 (溶液)中完成转化过程。也常利用酶母菌作基因工程的受体细胞，是因为酵母菌有 易培养、繁殖快 等特点。 14、什么叫转化？是指目的基因进入受体的细胞，并且在受体细胞内 维持稳定和表达 的过程。 15、动物基因工程常用 受精卵或胚胎干细胞 作受体细胞，原因是上述细胞具有 全能性 ，能直接发育形成新个体，还能使目的基因在 特定(或相应) 部位表达。 16、目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键是 转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 ，其检测方法是采用 DNA分子杂交技术 。在此技术中，探针应如何制备？ 将含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记(用放射性同位素标记的目的基因片段作探针) 。 17、目的基因的检测通常要检测三个方面，①检测转基因生物 染色体DNA上是否插入目的基因 ，检测方法为 DNA分子杂交 技术；②检测 目的基因是否转录出mRNA ，检测方法 分子杂交 技术；③检测目的基因是否 翻译成蛋白质 ，检测方法为用 相应的抗体 进行 抗原-抗体杂交 。除上述 分子 (水平)检测外，有时还需进行 个体 生物学水平的鉴定。如转基因抗虫棉是否抗虫，应如何检测？ 做抗虫的接种实验(将抗虫棉接种到转基因棉花植株上，看其是否抗虫) ，鉴定过程是： 做抗虫的接种实验，让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活(或发育)情况，以确定抗虫棉是否具有抗虫性状。 18、转基因抗虫棉转入的