嗜热微生物的分离及其产酶特性的初步研究.docx

嗜热微生物的分离及其产酶特性的初步研究王佳，易弋，夏杰，伍时华，黎娅*广西科技大学生物与化学工程学院（柳州545006）摘要从采集自温泉及高温堆肥的样品中分离纯化得到11株嗜热菌,通过分离菌株16SrDNA序列的分析对其进行了初步鉴定,其中地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)6株,凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)2株,嗜热脱氮芽孢杆菌(Geobacillusthermodenitrificans)1株,史氏芽孢杆菌(Bacillussmithii)1株,嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillusstearothermophilus)1株。并且针对蛋白酶、酯酶、淀粉酶、乳糖酶(β-半乳糖苷酶)、β-葡聚糖酶、木聚糖酶、羧甲基纤维素酶、α-半乳糖苷酶这8种饲料酶,采用唯一碳源或显色反应的方式对这些嗜热菌进行了产酶特性初步研究,检测结果表明这些嗜热菌均具有较强大的酶系,地衣芽孢杆菌和史氏芽孢杆菌产酶较多,分别可产其中的7种和6种酶。为嗜热酶的开发利用提供一定的理论基础。关键词嗜热微生物;芽孢杆菌;饲料酶IsolationandEnzymeSystemPreliminaryAnalysisofThermophilicMicroorganismsWangJia,YiYi,XiaJie,WuShi-hua,LiYa*CollegeofBiologicalandChemicalEngineering,GuangxiUniversityofScienceandTechnology(Liuzhou545006)AbstractEleventhermophilicmicroorganismswereisolatedfromhotspringsandcompostsamples,andidentifiedassixBacilluslicheniformisstrains,twoBacilluscoagulansstrains,Geobacillusthermodenitrificans,BacillussmithiiandGeobacillusstearothermophilusby16SrDNAanalysis.Andeightkindsoffeedenzymesweredetectedbythemethodofsinglecarbonsourceorchromogenicreactionfortheisolatedthermophilesincludingprotease,esterase,amylase,β-galactosidase,β-glucanase,xylanase,CMCaseandα-galactosidase.Theresultsshowedallthestrainshadrichenzymesystems,andBacilluslicheniformisandBacillussmithiisynthetizedmorekindsoftheseenzymesthanothers,7and6kindsrespectively.Theoreticalbasiswasprovidedfortheexploitationofthermophilicenzyme.Keywordsthermophilicmicroorganisms;Bacillus;feedenzyme饲料酶制剂指添加到动物日粮中，可以提高动物对营养的消化吸收、降低饲料中抗营养因子或产生对动物有特殊功能的酶制剂，是一种绿色安全节粮型添加剂[1]，这些优越性使得饲料酶在饲料工业中的应用越来越广泛。然而，饲料生产过程中往往需经历高温工艺，因此，热稳定性是饲料酶应用于工业生产中所要突破的重要问题。嗜热微生物，通常是指在高温环境中生长的微生物，其最适生长温度在45℃或以上[2]。早在1969年Brock就于美国黄石国家公园的热温泉中分离到最适生长温度高达70℃的水生栖热菌（Thermusaquaticus）[3]，此后嗜热微生物受到了越来越多的关注，在过去的30年里国内外研究者陆续从各种高温环境中分离出不同属种的嗜热菌[4-6]。由于嗜热微生物具有良好的耐高温特性，其作为热稳定性酶的一个重要来源受到了广泛的关注。从广西地区的温泉水和堆肥样品中分离纯化嗜热微生物，并针对蛋白酶、酯酶、淀粉酶、乳糖酶（β-半乳糖苷酶）、β-葡聚糖酶、木聚糖酶、羧甲基纤维素酶、α-半乳糖苷酶这8种常见饲料酶对分离菌株的产酶特性进行了初步研究，为广西地区嗜热微生物源饲料酶的开发和利用提供一定的理论基础。1材料与方法1.1材料1.1.1样品温泉样：采集自广西象州温泉、黎村温泉源头，泉水无色，温度约60℃，pH约7.0，其中纯水样100mL，含池壁青苔水样30mL。高温