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单克隆抗体的制备植物体细胞杂交
对位训练 5. 1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请据图回答问题: (1)病原体注入小鼠体内后,要经过____细胞处理后,才能被免疫细胞识别。 (2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集,然后以________________________作诱导剂,使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养,获得的杂交瘤细胞具有____ ____________________________ 吞噬 灭活的仙台病毒或聚乙二醇 产生特异性抗体,又能无限增殖 既能 的特点。 (3)单克隆抗体的特点是________________。根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法_________ __________________。 解析 灭活的仙台病毒和聚乙二醇均可诱导动物细胞融合。杂交瘤细胞同时具有两个亲代细胞的遗传特性。可以在体外也可以在体内培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 排雷 (1)制备单克隆抗体时选用一种抗原处理的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,产生杂交瘤细胞,它会兼有两个亲本细胞的特性——在体外培养条件下能不断增殖,同时能产生出某种特异性抗体。 (2)在诱导剂的作用下进行细胞的诱导融合,形成的杂种细胞有三种:AA型、BB型、AB型,只有AB型才是我们所需要的杂种细胞,所以需要用选择性培养基进行筛选。 特异性强,纯度高 和动物体内培养法 体外培养法 (3)相比较植物体细胞杂交,动物细胞融合特有的诱导方式为灭活的病毒处理,其他物理、化学诱导融合的手段与植物体细胞杂交过程中原生质体融合方法相同。 考点6 关注生物学热点内容——动物细胞核移植 与克隆技术引起的伦理问题 1.概念:动物细胞核移植是将动物的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。 2.操作流程 3.考点解读 (1)原理:动物细胞核的全能性(不能说动物细胞全能性)。 (2)卵母细胞选择时期及原因 减Ⅱ中期的卵母细胞,此时具备受精能力,细胞质中合成与分裂、分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化,形成重组胚胎。 (3)选卵细胞作为受体细胞的原因 ①大,易于操作;②卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养;③能激发重组细胞分裂分化。 (4)供体细胞:取供体动物的体细胞培养,一般选用传代10代以内的细胞,因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。 (5)动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体,原因是 动物体细胞的全能性受到限制。用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明动物体细胞的细胞核具有全能性。 (6)该过程用到的技术手段:动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。 (7)核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不同的原因 ①克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本。所以与植物组织培养不同(只来自于一个亲本),克隆动物遗传物质来自2个亲本。 ②在发育过程中可能发生基因突变,染色体变异导致性状改变。 ③外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。 4.应用及存在问题 (1)应用:加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育、 5.克隆人 (1)过程 (2)分类 都属无性繁殖;产生新个体、新组织,遗传信息相同 联系 个体水平 细胞水平 水平 用于生育,产生新个体 治疗人类疾病 目的 区别 生殖性克隆 治疗性克隆 类型 项目 保护濒危物种、克隆器官用于移植等。 (2)存在问题:①成活率低;②克隆动物的健康问题; ③克隆动物食品的安全性问题。 * 第十单元 现代生物科技专题 第 38 课时 细胞工程及克隆技术 引起的伦理问题 突破考点·提炼方法 1.操作流程及培养条件 (1)操作流程 考点1 技术原理——植物组织培养及细胞全能性 (2)培养条件:营养物质(水、无机盐、蔗糖、氨基酸和有机酸等)、激素(如细胞分裂素、生长素等)及其他条件(无菌、适宜的温度和pH等)。 提醒 ①幼嫩的组织脱分化较为容易,如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化,而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。 ②对外植体要进行消毒处理,而对各种器械要彻底灭菌。 ③植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖,用葡萄糖也可以,但后者的成本高。 ④诱导愈伤组织再分化形成胚状体或丛芽及生根的过程中,要进行换瓶处理,
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