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转基因产品检测技术简介 中德合作实验室 概 念 转基因生物（Genetically Modified Organisms，简称GMO）：包括转基因植物，转基因动物，转基因微生物等。 转基因产品—含有或生产过程中有转基因生物参与的产品。 转基因植物 Genetically Modified Plant，or Transgenic Plant 概念：运用重组DNA技术将外源基因整合于受体植物基因组、改变其遗传组成后产生的植物及其后代。 与传统的常规育种有何区别？ 转基因植物通常至少含有一种非近源物种或 种的遗传基因。 转基因植物的分类 抗除草剂的转基因植物（最早进入田间生产，目前栽培面积最大）如 Monsanto 的抗除草剂草甘膦大豆 抗虫转基因植物 如 Syngenta的Bt 176抗虫玉米 抗病转基因植物 （抗病毒，抗真菌，抗细菌） 抗环境胁迫转基因作物 （温度、水分、化学物） 植物发育调节基因工程 （控制果实成熟，雄性不育，改良植物品质） 医药领域中的转基因植物（利用植物作为生物反应器，生产药用蛋白、食用疫苗等） 遭受虫害的普通玉米 抗虫的Bt转基因玉米 适合转基因产品检测最佳方法所具备的要素 分子生物学基础 中心法则 DNA RNA 蛋白质 次生代谢产物 ? ? 国际目前检测重点 已发现一些变化 (安全评价) ? 目前已采用的检测方法 核酸水平 蛋白质水平 转基因生物（GMO）的检测略图 蛋白质检测方法 ELISA检测 试剂条快速检测 核酸检测方法 ??????? 定性PCR PCR检测 PCR-ELISA 定量PCR 目前应用方法的比较 蛋白质检测有关优缺点 优点： 检测时间短，价格便宜，适合原材料和初加工产品 ELISA 检测技术已被认可，广泛用于其他领域。 缺点： 每次只能检测一种GMO。 不同试剂盒的灵敏度不同 只有部分转基因产品的试剂盒有产品供应 用于RR大豆 和Bt 玉米ELISA检测 TraitCheck Test Kits RoundUpReadyTM 大豆的定性检测试剂盒: RUR Soybean Leaf and Seed Test Kit RUR Bulk Soybean Test Kit Bt-玉米的定性检测试剂盒: Bt Corn Grain Test Kit TraitCheck Test Kits原理 TraitCheck Kits检测结果解释 PCR检测的特点 利用筛查方法可以涵盖许多GMO。 检测特异性好。 能够检测未经批准的GMO。 检测非编码区的基因成分。 定量PCR可以得出定量检测结果。 在混合样品或深加工产品产品检测结果可靠 (由于 DNA非常稳定) DNA-生命的分子 DNA: 两条互补双螺旋链 PCR (聚合酶链式反应) PCR 反应示意图 PCR 反应原理示意图 江苏检验检疫局FOODSCAN 是 CCIC和GeneScan 的合作伙伴，负责 IP认证中的实验室检测。 谢谢大家！ Quantification of Roundup ReadyTM Soyawith the LightCycler * * 精品PPT课件 浏览免费 下载后可以编辑修改。 /jn-lxh /lianer2012 / / / 核酸物质（DNA），位于细胞核 Nucleus 蛋白质 功能产物 mRNA（信使RNA） 由DNA转录而来 Coated Surface Y Monoclonal Antibody A Coated Surface Antigen Coated Surface B C Coated Surface TMB TMB HPR Detector Antibody D * 酶链免疫反应 (ELISA) 96微孔板 Canola Cotton Soybean - + - + - + Lateral Flow Strip 检测示意图 变性 退火 低温 高温 引物结合 互补链延伸 Primer annealing at 50-70°C Melting of DNA at ~95°C Polymerisa