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第11章细胞核与染色体 第一节细胞核 细胞核的主要结构 ①核被膜（nuclear envelope） ②核仁（nucleolus） ③核基质（nuclear matrix） ④染色质（chromatin） ⑤核纤层（nuclear lamina）等 细胞核的结构，n为核仁，N为常染色质 Nuclear Envelope 一、核纤层 内核膜的内表面有一层网络状纤维蛋白质，叫核纤层（nuclear lamina），可支持核膜。 核纤层结构 核纤层 由核纤肽（lamin）构成，核纤肽分子量约60~80KD，是一类中间纤维。 在脊椎动物中，核纤层由3种属于IF的多肽混合而成。分别称为核纤层蛋白A、B、C。 向外与包埋在核内膜的脂质双分子层的特异Pr相结合，而核纤层的向染色质一面和染色质上的一些特殊位点相结合。 核被膜——崩解与装配 在真核细胞的细胞周期中，核被膜有规律地解体与重建 - 解体：前期结束时，双层核膜崩解成单层膜泡，核孔复合体解体，核纤层去装配- 重建：分裂末期，核被膜开始围绕染色体重新形成，某些部位内外膜融合，形成核孔复合体- 解体与重建的动态变化可能与核纤层蛋白的磷酸化与去磷酸化有关 核纤层在细胞分裂时呈现出周期性的变化 a.在间期核中，核纤层提供了染色质（异染色质）在核周边锚定的位点。 b.在前期结束时，核纤层被磷酸化，核纤层解裂为核纤层蛋白单体，核膜解体。 c.在分裂末期，核纤肽去磷酸化重新组装,，介导了核膜的重建。 核被膜——崩解与装配 磷酸化(作用) 去磷酸化 早末期 晚末期 核膜小泡融合 包围染色体膜融合 磷酸化的lamin 单体 Lamin 四聚体 Lamin 纤维 核孔复合体作为被动扩散的亲水性通道，有效直径为9-10 nm，长约15 nm。 离子、小分子及直径10 nm以下的物质原则上可以自由通过。 二、核孔复合体——运输作用 主动运输具有高度的选择性，表现在以下三个方面：- 对运输颗粒大小的限制：有效功能直径可被调节，约10-20nm，甚至可达26 nm。- 主动运输是一个信号识别与载体介导的过程，需要消耗能量，并表现出饱和动力学特征。- 主动运输具有双向性，即亲核蛋白的核输入，RNA分子及RNP颗粒的核输出。 1. 亲核蛋白的入核转运 亲核蛋白(karyophilic protein)是指在细胞质内合成后，需要或能够进入细胞核内发挥功能的一类蛋白质。 通过研究核质蛋白(nucleoplasmin)在非洲爪蟾卵母细胞的入核转运，发现了核定位信号(nuclear localization signal, NLS) 核内含量丰富的核质蛋白（nucleoplasmin）的C端有一个信号序列，可引导蛋白质进入细胞核，称作核定位信号（nuclear localization signal，NLS）。 第一个被确定的NLS是病毒SV40的T抗原，它在胞质中合成后很快积累在核中。其NLS为：pro-pro-lys-lys-lys-Arg-Lys-val，如果单个氨基酸被替换，就失去作用。 NLS的特点 位于核质蛋白（nucleoplasmin）的C端。 NLS由4-8个氨基酸组成，富含带正电核的Pro、Lys和Arg。 对其连接的蛋白质无特殊要求，（如：非亲核蛋白）。 完成核输入后不被切除，是蛋白质的永久部分。 Karyopherin是一类与核孔选择性运输有关的蛋白家族，相当于受体蛋白。 核输入受体（importin）负责将蛋白从细胞质运进细胞核。 核输出受体（exportin）负责相反方向的运输。 通过核孔复合体的转运涉及Ran蛋白。Ran是一种G蛋白，调节货物-受体复合体的组装和解体，在细胞核内Ran-GTP的含量远高于细胞质。 ①蛋白与NLS受体，即imporin α/β二聚体结合。不需要能量。 ②在importin β的介导下，货物与受体的复合物与NPC胞质环上的纤维结合。 ③纤维向核弯曲，转运器构象发生改变，形成亲水通道，货物通过核孔，进入核内。转移过程需GTP水解提供能量。 ④货物-受体复合体中importin β与Ran-GTP结合，复合体解散，释放出货物。 ⑤与Ran-GTP结合的imporin β，输出细胞核，在细胞质中Ran结合的GTP水解，Ran-GDP返回细胞核重新转换为Ran-GTP。 ⑥imporin α在核内核输出受体exportin的帮助下运回细胞质 。 核质蛋白向细胞核的输入过程 核质素输入细胞核的过程