光谱法研究Pb2、Hg2与牛血清白蛋白的相互作用研究.pdfVIP

2+与牛血清白蛋白的相互作用宰 冼谱法研究Pb2+、Hg 杜娟+刘华俊 (襄樊学院化学与生物科学系，湖北襄樊441053) 摘要：采用紫外可见分光光度法研究了在三羟甲基胺基甲烷．HCl(“s-Hcl)缓冲溶液中，阳离子表 面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(C仆似B)存在下，以酸性铬蓝K(ACBK)为光谱探针，牛血清 白蛋白(BsA)与铅离子、汞离子的相互作用机理及结合数；探讨了溶液酸度、反应温度及时间、 表面活性剂等条件对实验的影响。实验表明， 用力主要是配位键和静电作用。 关键词：光谱法；酸性铬蓝K．Pb2+(H92+)．配合物；牛血清白蛋白 中图分类号：0657．32文献标识码：A 对于蛋白质的各类研究是当前生命科学、化学、药学及临床医学等众多领域的重要研究课题。 为此，M]发展了各种光谱探针分析方法。所谓蛋白质光谱探针，就是能与蛋白质发生相互作用的无 机离子、有机小分子或络合物，这些物质与蛋白质结合生成超分子复合物之后，体系的光谱性质发生 变化，从而可以提供蛋白质浓度或结构方面的信息。研究重金属离子与牛血清白蛋白的相互作用的 方法多种多样，利用小分子及其配合物作为光谱探针与生物大分子作用I卜3】以其简捷、灵敏等优点而 被广泛应用。本实验以一种偶氮类有机小分子酸性铬蓝K为光谱探针，用光度法研究了微量重金属 元素铅离子、汞离子与牛血清白蛋白(BsA)的相互作用，对进一步探索相关生命问题具有一定的指导 意义。 1实验部分 1．1主要仪器和试剂 Tu一1900双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)， 汞(分析纯)、三羟甲基胺基甲烷(分析纯) 1．2实验方法 9．5的确s．HCl缓冲溶液和适量的BsA， 分别移取一定量的ACBK溶液、Pb2+、H92+离子溶液，pH 于25 IIlL容量瓶中，均用相应的Tris．Hcl缓冲溶液配制后混匀。选用适当的测量参数，应用分光光 度计考察紫外．可见光吸收光谱，研究体系反应的影响因素和作用机理。 2结果与讨论 2．1ACBK．Pb2+．BSA、ACBK．H92+．BSA体系的光谱特征 ’基金项目：湖北省教育厅科学技术研究项目( 作者简介：杜娟(1955一)，女，山西洪洞人，湖北襄樊学院化学与生物科学系教授，主要从事光谱分析。联系电 话：07lo-380555 q q∞∞O ¨ _ Ⅻ m_- _ _-m “m 1^蜘 2．AcBlo 图1．AcBK．Pb2+-BsA体系的吸收曲线 H矿+-BsA体系的吸收曲线 9．5的Tris-Hcl缓冲溶液 图1、2分别为在阳离子表面活性剂cTMAB的存在下，pH 4．7，pH 距离增大。而阳离子表面活性剂Cn舱B的存在，对体系具有增敏、增稳作用，又导致ACBK．Pb2+ 水基团间的相互吸引作用，使两者接近的程度更大，从而导致静电引力的进一步增强，但这种作用 在此处较弱，这主要表现为吸收峰稍有蓝移，吸光度变化不大(如图1)。同时，在pH9．5时，BsA分 子中的组氨酸残基的咪唑基、半胱氨酸残基的巯基对汞离子的配位能力大于铅离子，这是 ≈1；l(M=Pb2+、H92+)，一个BsA可结合56个酸性铬蓝K分子。 2．2测定条件的优化 实验中分别研究了重金属元素铅离子、汞离子与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用，以及溶液酸度、 反应温度与时间、表面活性剂等条件对反应体系的影响。 实验表明，在2．OmlpH9．5Tns．HCl缓冲溶液中，3．Oml阳离子表面活性剂的存在下，酸性铬蓝 内吸光度基本不变。 参考文献 【I】李娜涨玉平，魏永巨．磺基水杨酸与牛血清白蛋白相互作用的荧光法研究【_，】．河北师范大学学报(自然科学版)， 2004．28(1)：50-54 【2】孙伟，韩军英，尚智美等．酸性铬蓝K．蛋白质结合反应体系的极谱分析【J】．理化