微生物生态研究中Biolog Eco微平板培养时间对分析结果的影响.pdfVIP

第2l卷1期 应用基础与工程科学学报 V01．21．No．1 2013 2013年2月 OFBASIC February JOURNAL SCIENCEANDENGINEERING 文章编号：1005-0930(2013)01-0010-010中图分类号：171．4 文献标识码：A doi：10．3969／j．issn．1005-0930．2013．01．002 Eco微平板培养 微生物生态研究中Biolog 时间对分析结果的影响 贾 夏， 董岁明， 周春娟 (长安大学环境科学与工程学院，陕西西安710054) Eco微平板法已广泛用于环境微生物研究，能很好地反映不同环境 摘要：Biolog 下微生物群落差异性特征，而分析结果可能会受Eco微平板培养时间的影响，据 此，本研究从AWCD值、微生物群落多样性指数、碳源代谢强度及代谢方式和 PCA分析等角度，探讨了BiologEco微平板培养时间对分析结果的影响特征．研 究表明：BiologEco微平板培养时间处于AWCD曲线“拐点”前与“拐点”后对分 析结果影响显著(PO．05)，且“拐点”前各培养时间段微生物群落特征的分析 结果明显不同，但培养时间处于AWCD曲线“拐点”处及其后各培养时间段的分 析结果基本一致，且培养时间对分析结果的影响很小或可忽略不计，可能会较客 Eco微 观地反映环境微生物群落特点及不同样品间的差异性．因此，采用Biolog 平板分析环境微生物群落特征时，建议微平板选择240h培养并连续读数，再根 据240h的AWCD曲线“拐点”进行数据合理地选取和分析，得出的结论相对可 能会与实际环境情况更为接近． 关键词：BiologEco微平板；培养时间；多样性指数；碳源代谢强度；碳源利用率；主成分分析 微生物是地球化学循环中的重要组分，由于其分布广泛，对环境敏感、变异快，且在生 态系统中具有不可替代的作用，受到众多科学家的重视¨引．而目前在微生物生态中关于 微生物多样性研究使用的方法很多，如DGGE(变性梯度凝胶电泳)HJ、RnP(随即片段多 板技术由于操作简单、获得数据量丰富且能直观地反映出微生物种群的总体活性，可以明 确环境微生物功能多样性的特征，受到众多研究者的青睐． BIOLOG方法是基于测定微生物对不同碳源利用程度的差异来表征其生理特性不 同口J，其原理是通过直接在微平板中进行针对微生物群体的培养，并实时监测其引起的 吸光度变化来表征其生理特性¨引，该方法是揭示微生物群落间差异的强大工具，且反馈 的数据量十分丰富，每一孔的吸光度均可作为样品的1个变量进行分析．一般研究者采用 收稿日期：201l-10-24；修订日期：2012-04-01 基金项目：国家自然科学基金31270665)；中央高校基金(CHD2009JCl44) 作者筒介：贾夏(1975一)，女，博士，副教授．E-mail：jiaxiarmvy@163．corn No．1 贾夏等：微生物生态研究中BiologEeo微平板培养时间对分析结果的影响 1l 较多研究，但涉及的主要是培养时间对微生物群落敏感性的影响¨1|，而BIOLOG微平板 培养时间的长短是否会影响分析结果的准确性目前还未见报道．据此，本研究探讨 合理选择提供参考． 1材料与方法 1．1试验设计 供试土壤采集于陕西关中地区冬小麦产区表层土0—20cm，去掉根系等杂物风干后 pH值8．452． 依据我国“土壤环境质量标准(GB 源污染物的形式，同时测定土壤含水量用以计算添加重金属的量，平衡15d后装盆，每盆