抗体高产中国仓鼠卵巢细胞细胞株生理生化特征、糖代谢及单克隆抗体基因表达量的分析.pdfVIP

第 27 卷第 6 期 高 校 化 学 工 程 学 报 No.6 Vol.27 2013 年 12 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities Dec. 2013 文章编号：1003-9015(2013)06-1032-07 抗体高产中国仓鼠卵巢细胞细胞株生理生化特征、糖代谢及 单克隆抗体基因表达量的分析 张存超, 赵 亮, 陈 飞, 范 里, 王泽宋, 谭文松 (华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237) 摘 要： 产物比生成速率是衡量细胞株表现的重要指标，研究产物比生成速率有差异的细胞株有助于深入理解此参 数，进而为获得具有高产物比生成速率的细胞株提供借鉴。以表达单克隆抗体的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞为研究对象， 通过有限稀释法筛选获得了抗体比生产速率比对照提高 57.8% 的亚克隆。以此为基础，对其生理生化特征、葡萄糖 代谢以及抗体轻重链基因表达量进行了详细的分析。此亚克隆在 Hyclone SFM4CHO 培养基批次培养中，最高活细胞 密度比对照降低了68.6%，其在指数生长期细胞干重、细胞直径、胞内总蛋白含量及胞内总蛋白和细胞直径比与对照 相比均有不同程度的增加，且其表达产物的轻重链基因和信使 RNA 相对含量均有所提高。代谢方面，此亚克隆的葡 萄糖比消耗速率比对照增加了77.9%，指数生长期线粒体相对合成活性比对照增加了172.5%，有助于增加产物的翻译 速率。通过研究对表达单克隆抗体的高产亚克隆生理生化特征、葡萄糖代谢以及抗体轻重链基因表达量的分析，可为 深入理解细胞培养过程中产物比生成速率的提高提供借鉴，同时为高产细胞株的构建和筛选提供指导。 关键词：有限稀释法；中国仓鼠卵巢细胞；抗体比生产速率；葡萄糖代谢 中图分类号：Q813.1 文献标识码：A DOI ：10.3969/j.issn.1003-9015.2013.06.018 Physiological and Biochemical Characteristics, Glucose Metabolism and Monoclonal Antibody (mAb) Gene Expression Analysis of the Artificially Selected Chinese Hamster Ovary Cell Variants with Enhanced mAb Productivity ZHANG Cun-chao, ZHAO Liang, CHEN Fei, FAN Li, WANG Ze-song, TAN Wen-song (State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China) Abstract: Product specific productivity represents an overwhelming parameters for cell line, thus studies on cell lines with differed productivity provide deeper insights for understanding this parameter, and ma